微小RNA-218对大鼠膝骨关节炎细胞的增殖与凋亡调控作用机制研究

发布时间：2021-04-05 12:56

　　目的研究微小RNA-218（miR-218）通过调控Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路对大鼠膝骨关节炎（KOA）细胞增殖与凋亡的影响。方法按照体重将SD大鼠随机分为4组:空白对照组、模型组、第1转染组和第2转染组,每组15只。模型组、第1转染组和第2转染组大鼠通过向双侧膝关节腔内注射碘乙酸进行KOA造模。成功造模1周后,空白对照组与模型组大鼠注射等量0.9%NaCl,第1转染组大鼠注射慢病毒灭活miR-218质粒3μL(滴度5.0×10¹² copies·mL^-1);第2转染组大鼠注射慢病毒灭活miR-218质粒3μL(滴度5.0×10¹² copies·mL^-1)+Wnt/β-catenin信号通路激动剂SKL2001(40μmol·L^-1)。用逆转录-PCR法检测软骨组织miR-218基因的表达（OD比值×100）,CCK-8检测细胞增殖水平,AnnexinV-FITC/PI染色分析细胞凋亡状态,蛋白质印迹法检测细胞中Bcl-2基因相关X蛋白（Bax）、B细... 

【文章来源】：中国临床药理学杂志. 2020,36(22)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
材料与方法
    1 材料
    2 实验方法
        2.1 KOA大鼠模型建立
        2.2 分组、药物干预与取材
        2.3 以RT-PCR法检测大鼠软骨组织miR-218基因表达[5]
        2.4 以CCK-8试剂盒检测大鼠软骨细胞增殖[6]
        2.5 以Annexin V-FITC/PI试剂盒检测大鼠软骨细胞凋亡
        2.6 以蛋白质印迹法检测大鼠软骨组织Bcl-2、Bax、β-catenin和Wnt蛋白的表达[8]
    3 统计学处理
结 果
    1 各组大鼠软骨组织miR-218基因表达比较
    2 各组大鼠软骨细胞增殖水平比较
    3 各组大鼠软骨细胞凋亡率比较
    4 各组大鼠软骨组织Bcl-2、Bax、β-catenin和Wnt蛋白表达比较
讨 论



本文编号：3119674