CGRP通过cAMP/PPARγ/eNOS途径改善血管内皮细胞胰岛素抵抗

发布时间：2021-04-05 18:41

　　背景与目的:血管功能异常是糖尿病的主要并发症,其中,内皮细胞损伤或对葡萄糖的利用障碍是血管功能重构的重要环节,本研究通过建立内皮细胞胰岛素抵抗模型,探讨感觉神经末梢释放的强舒血管活性肽—降钙素基因相关肽（CGRP）对人脐静脉内皮细胞胰岛素抵抗模型中的保护作用及其信号转导机制。方法:以人脐静脉内皮细胞（HUVEC）作为对象。光学显微镜下观察细胞形态;用33.3mmol/L高糖和不同浓度的胰岛素处理内皮细胞24h和48h,通过检测培养中上清液中的葡萄糖消耗量和细胞糖原合成量,及细胞e NOS的表达,确定内皮细胞胰岛素抵抗模型成功建立;用10nmol/L CGRP处理内皮细胞胰岛素抵抗模型24h,分别用葡萄糖氧化酶法和蒽酮-硫酸法检测内皮细胞胰岛素抵抗模型中的葡萄糖消耗能力和糖原合成能力;Western blot检测PPARγ和e NOS的蛋白表达,RT-PCR检测PPARγ和e NOS的基因表达;为了检测CGRP是否通过c AMP上调PPARγ和e NOS蛋白的表达,使用AC阻断剂SQ22536检测下游蛋白PPARγ和e NOS蛋白基因表达变化。结果:33.3mmol/L的高糖和5μmol... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 绪论
第2章 材料
    2.1 主要试剂
    2.2 主要仪器
第3章 主要方法
    3.1 人脐静脉内皮细胞的培养
    3.2 葡萄糖氧化酶-过氧化酶法检测细胞培养基中葡萄糖
    3.3 蒽酮-硫酸法检测细胞内糖原含量
    3.4 Western-Blot法检测蛋白表达
    3.5 RT-PCR法检测mRNA的表达
    3.6 统计学分析
第4章 结果
    4.1 HUVEC胰岛素抵抗模型的建立
        4.1.1 不同浓度的胰岛素对内皮细胞的葡萄糖的消耗量的改变
        4.1.2 内皮细胞胰岛素抵抗组细胞形态变化
        4.1.3 IR模型组处理不同的时间检测细胞糖原合成能力
    4.2 CGRP改善内皮细胞的胰岛素抵抗
        4.2.1 CGRP增加胰岛素抵抗内皮细胞中葡萄糖消耗量
        4.2.2 CGRP增加胰岛素抵抗内皮细胞中糖原合成
        4.2.3 CGRP上调内皮细胞IR中PPARγ 和e NOS蛋白和基因表达
    4.3 信号转导机制
        4.3.1 AC阻断剂对胰岛素抵抗内皮细胞的PPARγ 蛋白和m RNA的影响
第5章 讨论
第6章 结论
参考文献
文献综述 血管内皮细胞来源的主要酶类及其功能
    参考文献
科研成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
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本文编号：3119898