靶向hERG通道荧光探针的设计及生物学评价

发布时间：2021-04-09 11:03

　　hERG通道是药物心脏安全性评价的重要靶点,同时还与多种肿瘤细胞的循环周期密切相关,如:结肠癌,胃癌,恶性胶质瘤和白血病。因此评价hERG通道在生物系统中的功能对了解肿瘤细胞的生理活动特点以及药物筛选具有重要的意义。目前,膜片钳技术、放射性配体标记和荧光分析法等一系列技术手段已用于hERG通道的功能评价,但是这些技术手段在高通量、灵敏度、选择性及环境友好型等方面仍然存在着缺陷,如:膜片钳技术的低通量性,放射性配体标记的放射性环境污染以及荧光分析法的低选择性。为了高效、快速、准确地了解hERG通道在生物系统中的作用,需要一种简单、高通量、特异性强、灵敏度高的分析方法。因此,我们基于新的靶向基团——4-苄基苯胺设计了一个结构简单的荧光探针CBH用于hERG通道荧光成像及标记。通过电生理实验、荧光共聚焦成像和免疫荧光共定位等手段证明了CBH对hERG通道的高特异性。研究结果表明,探针CBH的荧光发射机制受溶剂致变色及分子旋转双重调控。双重调控机制有效增大大了探针的荧光发射信号,从而大大提高了CBH对hERG通道的灵敏性。此外,探针CBH的高灵敏性在hERG蛋白低表达的肿瘤细胞中得到了进一步印... 

【文章来源】：青岛大学山东省

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

CBH的结构和hERG蛋白作用机制

图 2 CBH、ZBH、BBH 的合成路线3.2 CBH 的荧光和紫外光谱检测探针 CBH 在 DMSO 溶解后，得到 CBH 储备溶液（1 mM）。取 20 μl 储备溶液

CBH 的紫外吸收光谱也发生了明显的变化（图2.1B）。为了解释这一现象，我们在不同比例的 DMSO 组分中进行了动态光散射分析。如图 1.2 所示，在含有 50%DMSO 的 DMSO/水体系中，CBH 的平均粒径约为820 nm，表明 CBH 在这一体系中主要处于聚集状态。而在含有 60% DMSO 体系中时，CBH 的粒径大小几乎无法检测到，表明 CBH 处于完全分散的状态。考虑到两种体系所对应的荧光状态变化，这种在聚集态下荧光发射变弱似乎与聚集致猝灭（ACQ）的现象一致。然而我们发现

【参考文献】：
期刊论文
[1]Optopharmacological control of TRPC channels by coumarincaged lipids is associated with a phototoxic membrane effect[J]. Oleksandra Tiapko,Bernadett Bacsa,Gema Guedes de la Cruz,Toma Glasnov,Klaus Groschner.  Science China（Life Sciences）. 2016(08)
[2]抗心律失常药物作用的靶点——HERG K+通道[J]. 关凤英,杨世杰.  药学学报. 2007(07)



本文编号：3127510