DNA甲基化转移酶在结肠癌细胞干性维持中的作用与机制研究

发布时间：2021-04-11 06:51

　　研究目的与背景近年来,结肠癌的发病率与死亡率不断升高,已成为导致我国癌症病人死亡的主要原因之一。结肠癌患者的死亡多是由于发生了肝转移,约有60%以上的晚期结肠癌病人均伴有不同程度的肝转移。结肠癌的发病机理十分复杂,干细胞理论认为肿瘤组织中具有干细胞样特性的细胞才是导致结肠癌发生的原因。不同于一般的肿瘤细胞,肿瘤干细胞（cancer stemcell,CSC）可以在增殖过程中保持自我更新,同时还具有较强免疫逃逸能力;虽然CSC数目很少,但可引起肿瘤的发生或者转移;而且CSC对传统的治疗手段有着相当高的抗性,容易导致肿瘤复发。因此,靶向CSC被认为是新的、有效的治疗包括结肠癌在内的大多数肿瘤的重要手段之一。肿瘤的发生除了伴有重要功能基因的突变以外,还与一些特定基因的表观遗传学修饰有关系。表观遗传学修饰中甲基化修饰方面的报道居多,且机制比较明确。异常的DNA甲基化,会引起一些重要的基因表达发生变化,不断累积后会使细胞功能发生改变,进而导致细胞分化或增殖异常,致使各类疾病甚至是肿瘤发生。有趣的是,DNA甲基化是一种特殊的、可逆的生化修饰方式,通过DNA甲基转移酶（DNMT）进行调控。研究表明,... 

【文章来源】：中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１基因ＣｐＧ岛区域胞嘧啶的甲基化修饰??

ＤＮＡ甲基化转移酶在结肠癌细胞干性维持中的验结果??ＤＣ对结肠癌细胞ＤＮＭＴ活性的影响??Ｃｏｎｔｒｏｌ组与２．５?ｐＭ、５?ｐＭ和１０?ｐＭ５－ＡｚａＤＣ不同浓度核蛋白的浓度。之后使用ＤＮＭＴ活性检测试剂盒检测不，根据?ＤＮＭＴ?Ａｃｔｉｖｉｔｙ?（ＯＤ／ｈ／ｍｇ）?＝?（Ｎｏ?Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ?ＯＤ?－ｏｕｎｔ?（｜ａｇ）?ｘ?ｈｏｕｒ）?ｘ?１０００计算各组核蛋白样品ＤＮＭＴ的Ｃ能够抑制细胞ＤＮＭＴ的活性，与Ｃｏｎｔｒｏｌ组相比，后结肠癌细胞ＤＮＭＴ活性显著降低。??

为观察５－ＡｚａＤＣ结肠癌细胞干性特征的影响，我们首先检测了不同浓度５－ＡｚａＤＣ??对结肠癌细胞克隆形成能力的影响，各处理组药物浓度的设置与生长实验相同。结果??如图１－４所示，与Ｃｏｎｔｒｏｌ组相比，当给予不同浓度的ＤＮＭＴ抑制剂处理后，ＨＣＴ１１６??和ＳＷ６２０细胞的克隆大小以及克隆的形成率显著下降。??５－ＡｚａＤＣ??Ｃｏｎｔｒｏｌ???＿?Ｃｏｎｔｒｏｌ?□?２．５ｕＭ??２．５ｕＭ?５．０ｕＭ?ｉ〇ｕＭ?白?５〇ｕＭ?ｃｎｕ?ｉ〇ｕＭ??？?Ｊ——．??ｒｎ?？＜？？?？?〇＞?１５０＊１?１?￣￣￣?１?ｉ?１??■?Ｉ?＾?３Ｔ??￥１００＿ｌ?Ｉ??０?￡?５０■圓?■??１?：?Ｉ?〇１ｌ＾ｒｉ＾??ＨＣＴ１１６?ＳＷ６２０??图１－４不同浓度５－ＡｚａＤＣ对结肠癌细胞克隆形成的影响（ｎ＝３；?＊＊＊ｐ＜０．００１）??３．２对结肠癌细胞自我更新能力的影响??成球实验是体外检测肿瘤细胞自我更新能力的重要实验方法，也是衡量ＣＳＣ干??性的重要标准。于是，我们通过该实验来观察抑制结肠癌细胞ＤＮＭＴ活性是否会影??－２０－??


本文编号：3130790