萘醌老化黑碳对Treg分化的影响及机制研究

发布时间：2021-07-08 03:55

　　目的探讨萘醌老化黑碳（1,4NQ-BC）对Treg细胞分化的影响及其机制方法从6～8周龄C57BL/6小鼠的浅表淋巴结中用磁珠分选法提取幼稚CD4⁺T细胞,分为对照组（Th0）、TGF-β诱导组（TGF-β）和在TGF-β基础上加入1,4NQ-BC的处理组（5 ng/ml的TGF-β+50μg/ml的1,4NQ-BC）,于体外诱导分化,3 d后收集细胞,用Foxp3-PE染色后进行流式检测;取适量各组细胞提取蛋白,进行Western blot实验,检测Smad2蛋白量结果 TGF-β诱导组相对于对照组Treg细胞比例从0.75%增加到43.4%（P<0.05）,加入1,4NQ-BC的处理组相较于TGF-β诱导组,Treg细胞比例从43.4%下降至10.33%（P<0.05）;Western blot实验显示相对于TGF-β诱导组, 1,4NQ-BC处理组TGF-β通路上的Smad2蛋白量明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 1,4NQ-BC在体外抑制幼稚CD4+T细胞向Treg分化,其作用机制可能是通过抑制TGF-β通路上的Smad2... 

【文章来源】：毒理学杂志. 2020,34(02)CSCD

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

1,4NQ-BC对Smad2蛋白的影响

采用MTT染色法,检测了1,4NQ-BC染毒后T细胞的存活率,参考本实验室之前的研究结果,设立了5组染毒浓度。实验结果表明(图1),25、50、75和100 μg/ml组细胞存活率分别为96.6%、93%、86%和62%。其中75与100 μg/ml组细胞存活率相比于对照组降低,差异具有统计学意义(P<0.05),所以选择较为合适的50 μg/ml作为后续实验的染毒浓度。2.1.3 1,4NQ-BC对流式检测结果影响的排除:

对3组细胞提取的蛋白进行Western blot,得到的结果如图3所示,相对于Th0组,TGF-β诱导组的Smad2含量稍有升高,差异具有统计学意义(P<0.05);给予1,4NQ-BC后,相对于TGF-β诱导组,Smad2蛋白含量明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。图3 1,4NQ-BC对Smad2蛋白的影响

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3270807