粒径可调控的智能载药纳米体系的构建及抗肝癌功效研究

发布时间：2021-07-23 02:16

　　本项目选用生物可降解的多聚赖氨酸树枝状大分子（DGL）作为纳米颗粒的内核骨架,通过酰胺化反应将靶向配体甘草次酸（GA）和正电荷阻断剂四氢苯酐（DCA）与DGL共价键合,利用静电吸附作用上载抗癌药物阿霉素（DOX）,最后包裹透明质酸外壳（HA）,制得具有理想粒径的DGL-GA-DCA-DOX-HA纳米颗粒。以期在EPR效应的基础上,HA外壳经过肿瘤微环境中过表达的透明质酸酶水解,定向实现纳米颗粒粒径的缩小,使纳米颗粒顺利渗透进入肿瘤内部,并进一步在GA介导的细胞内在化和DCA触发的溶酶体逃逸双重作用下,将DOX精准运送至肝癌细胞中并释放于胞质内发挥药效。这种将多种功能整合在同一载药纳米体系中的构思,极大地发挥了纳米颗粒优良的抗肿瘤效果。然后,对DGL-GA-DCA-DOX-HA纳米颗粒进行理化性质表征和体内外抗肿瘤功效研究。通过形貌观察和粒径检测发现,合成的DGL-GA-DCA-DOX-HA为粒径182.5 nm的球形颗粒,并且经过肿瘤微环境中高表达的透明质酸酶降解后,该纳米体系可以释放出粒径较小的DGL-GA-DCA-DOX纳米颗粒（47.7 nm）。通过对DGL-GA-DCA-DOX... 

【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

载药纳米粒的合成路线和体内抗肿瘤机制的示意图

。然后，利用DOX的正电性与带有负电荷的DGL-GA-DCA混合，通过静电吸引上载药物DOX。最后，利用DGL-GA-DCA-DOX与负电荷的HA之间的静电作用，进一步以DGL-GA-DCA-DOX为内核，用HA包裹形成更大粒径的核壳结构。经计算，药物的上载率为69.64%，最终产物DGL-GA-DCA-DOX-HA纳米颗粒的药物负载量达到148.3mg/g。2.3.2纳米颗粒的形貌观察与粒径检测利用动态光散射仪和透射电子显微镜表征了DGL-GA-DCA-DOX、DGL-GA-DCA-DOX-HA和经过透明质酸酶提前孵育的DGL-GA-DCA-DOX-HA纳米颗粒（简写为DGL-GA-DCA-DOX-HA+HAase）的形貌和粒径。图2-1为DGL-GA-DCA-DOX（图2-1A）、DGL-GA-DCA-DOX-HA（图2-1B）和DGL-GA-DCA-DOX-HA+HAase纳米颗粒（图2-1C）的透射电镜图。由图像可以看出，DGL-GA-DCA-DOX纳米颗粒呈均匀的球状，粒径大约在40nm左右；经过HA包裹后的DGL-GA-DCA-DOX-HA纳米颗粒粒径有了明显的增大，纳米颗粒的外层能清楚地观察到一层光滑的薄膜，这在一定程度上表明了HA的成功包覆；经过透明质酸酶提前孵育的DGL-GA-DCA-DOX-HA纳米颗粒重新恢复小颗粒的状态且分散均匀，说明了透明质酸酶可以降解纳米颗粒的HA外壳，释放出较小粒径的DGL-GA-DCA-DOX内核。图2-1纳米颗粒的透射电镜图A:DGL-GA-DCA-DOX;B:DGL-GA-DCA-DOX-HA;C:DGL-GA-DCA-DOX-HA+HAase图2-2显示的是通过动态光散射仪检测到的DGL-GA-DCA-DOX（图2-2A）、DGL-GA-DCA-DOX-HA（图2-2B）和DGL-GA-DCA-DOX-HA+HAase纳米颗粒（图2-2C）粒径的精确结果。DGL-GA-DCA-DOX的平均粒径为44.2nm，经过HA包裹后的DGL-GA-DCA-DOX-HA纳米颗粒粒径增至182.5nm左右，而与透明质酸酶一起孵育过的DGL-GA-DCA-DOX-HA纳米颗粒粒径重新减小到47.7nm，这些粒径结果与上文中透射电镜结果相互辅证。以上结果充分证明

纳米颗粒的粒径分布图A:DGL-GA-DCA-DOX;B:DGL-GA-DCA-DOX-HA;C:DGL-GA-DCA-DOX-HA+HAase


本文编号：3298381