蓖麻毒素的检测及其在靶向抗肿瘤中的应用研究

发布时间：2021-08-01 11:58

　　蓖麻毒素是从蓖麻籽中提取的剧毒蛋白质,是一种异源二聚体糖蛋白,含有A、B两条链,通过一个二硫键连接。其中,A链（RTA）是毒性链,通过不可逆地使真核细胞的核糖体失活而抑制蛋白质的合成;B链（RTB）是凝集素,能够结合细胞膜表面含有半乳糖基的受体,促进蓖麻毒素进入细胞。蓖麻毒素毒性极强,至少是有机磷神经毒素的380倍,是氰化物的6000倍。蓖麻毒素在临床上具有广谱的抗肿瘤活性,然而由于B链对细胞膜上受体的识别是非特异性的,限制了其在靶向抗肿瘤上的应用。因此如何既能保留蓖麻毒素对肿瘤细胞的毒性,又能降低其毒副作用便成为研究的热点。此外,由于其毒性强、制备简单的特点,已被美国疾病控制中心（CDC）列为最有可能用于恐怖袭击的生物战剂之一。因此,对其进行灵敏的分析检测无论是在应对恐怖袭击还是在预防中毒方面都具有非常重要的意义。鉴于此,本论文设计了基于氧化石墨烯的等温链替换聚合酶反应的方法用于蓖麻毒素的检测;同时结合具有靶向高尔基体能力的碳点,核仁素核酸适配体以及光敏剂构建基于蓖麻毒素的多功能肿瘤细胞靶向治疗体系。具体研究内容包括以下两个方面:（1）设计了一种简单、准确、灵敏的基于氧化石墨烯的等温... 

【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：90 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

蓖麻毒素脱嘌呤的发光分析检测[25]

西南大学硕士学位论文的底物后，底物被酶催化变为有色产物，有色产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅来进行定性或定量分析。由于酶催化的高效性，可使测定方法具有很高的灵敏度。但是目前商用的蓖麻毒素检测试剂盒仅用于环境样品的测定，而 Weng 等[13]开发了一种 ELISA 法，不仅可以实现对环境样品的检测，还可以实现对生物中毒 4 小时到 5 天后的粪便样品的灵敏检测，为临床医师快速诊断和排除蓖麻毒素中毒案例提供了可能。免疫聚合酶链反应，即以 PCR 为基础，以抗体作为靶物的识别单元而建立的检测方法[30, 31]。如图 1-3 所示，Zhang 等[31]利用能识别并结合蓖麻毒素的多克隆抗体功能化的磁珠探针去捕获靶物，再用蓖麻毒素 A 链的抗体和信号 DNA 修饰的金纳米粒子探针去识别靶物构建三明治结构，磁分洗涤后，通过 DNA 去杂交技术得到大量的信号 DNA，最后利用 PCR 技术对 DNA 进行扩增，通过检测 DNA 的含量实现对蓖麻毒素的检测。

还可以实现对生物中毒 4 小时到 5 天后的粪便样品的灵敏检测，为临速诊断和排除蓖麻毒素中毒案例提供了可能。免疫聚合酶链反应，即以 PCR 为基础，以抗体作为靶物的识别单元而建方法[30, 31]。如图 1-3 所示，Zhang 等[31]利用能识别并结合蓖麻毒素的多功能化的磁珠探针去捕获靶物，再用蓖麻毒素 A 链的抗体和信号 DNA 修米粒子探针去识别靶物构建三明治结构，磁分洗涤后，通过 DNA 去杂交大量的信号 DNA，最后利用 PCR 技术对 DNA 进行扩增，通过检测 DN实现对蓖麻毒素的检测。图 1-3 基于纳米粒子的聚合酶链反应测定蓖麻毒素原理[31]igure 1-3. A nanoparticle-based bio-barcode polymerase chain reaction assay for ultrasensidetection of ricin toxin

【参考文献】：
期刊论文
[1]双抗体夹心酶联免疫法检测不同样品中的蓖麻毒素[J]. 郎立伟,王玉霞,王晨宇,赵宇,贾培媛,傅风华.  国际药学研究杂志. 2009(01)
[2]双抗体夹心酶联免疫检测法测定蓖麻毒素[J]. 杨运云,牟德海,童朝阳,穆唏惠,郝兰群.  分析化学. 2007(03)



本文编号：3315484