黏着斑激酶抑制剂Y15对中心静脉导管联合5-氟脲嘧啶诱导的细胞氧化损伤的作用机制研究

发布时间：2021-08-05 06:54

　　目的研究抑制黏着斑激酶（FAK）-蛋白激酶B（Akt）信号通路活化在减轻中心静脉导管（CVC）联合5-氟脲嘧啶（5-FU）诱导的血管内皮细胞氧化性损伤中的作用及其机制。方法将EA.hy926细胞随机分为3组:正常组、模型组和实验组,每组3个时间点:24,48,72 h,每个时间点8个复孔。模型组（CVCs+划痕+5-FU）,细胞划痕后,放入截好的CVC节段3个,再加入5-FU(40μg·mL^-1),建立EA.hy926细胞氧化损伤模型;实验组在模型组基础上加入FAK抑制剂(Y15,50μmol·L^-1)。以噻唑蓝比色法检测各时间点（24,48,72 h）细胞活性（OD值）,以2,7-二乙酸二氯荧光素检测细胞活性氧（ROS）水平,硝酸还原酶法测定细胞培养液中一氧化氮（NO）含量,以蛋白质印迹法检测细胞中p-FAK Tyr 397和p-Akt Ser 473的表达水平（灰度值）。结果干预72 h后,正常组、模型组和实验组的细胞存活率分别为（94.80±3.27）%,（50.20±3.96）%和（71.00±2.92）%;这3组的ROS相对水平分别... 

【文章来源】：中国临床药理学杂志. 2020,36(17)北大核心CSCD

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
材料与方法
    1 材料
    2 实验方法
        2.1 细胞培养、细胞模型制备、分组与处置
        2.2 用 DCF 法检测 EA.hy926 细胞 ROS 水平
        2.3 以硝酸还原酶法测定细胞培养液中NO 含量
        2.4 用 MTT 比色法检测细胞活性[5]
        2.5 以蛋白质印迹法检测细胞 p-FAK Tyr 397 和 p-Akt Ser 473 蛋白表达[6]
    3 统计学处理
结 果
    1 Y15对CVC联合5-FU诱导的细胞存活率的影响
    2 Y15对CVC联合5-FU诱导的细胞ROS相对水平的影响
    3 Y15对CVC联合5-FU诱导的细胞中NO含量的影响
    4 Y15对各组细胞中p-FAK Tyr 397和p-Akt Ser 473水平的影响
讨 论


【参考文献】：
硕士论文
[1]奧美拉唑和5-氟尿嘧啶合用对人胃癌细胞的抗增殖、迁移作用研究[D]. 董馨文.山东大学 2016



本文编号：3323291