异丙酚通过NLRP3/IL-1β信号通路影响脂多糖诱导的肺泡巨噬细胞M1/M2表型分化

发布时间：2021-09-02 22:50

　　目的研究异丙酚对脂多糖诱导的肺泡巨噬细胞的免疫应答影响及相关机制进行初步探讨。方法分离大鼠原代肺泡巨噬细胞（AMs）,并将细胞分为4组:对照组（control组:常规培养AMs）,脂多糖组（LPS组:加入终质量浓度为1 000 ng/L脂多糖）,异丙酚组（P组:加入终浓度为25μmol/L异丙酚）,脂多糖+异丙酚组（LPS+P组:加终质量浓度为1 000 ng/L的LPS和25μmol/L异丙酚）。4组细胞常规培养24 h后,应用ELISA检测4组细胞培养上清液中IL-1β、IL-10、TNF-α的含量;细胞流式实验检测4组细胞表面F4/80、CD16/32、CD206分子表型所占比例;免疫磁珠分选F4/80+细胞,并利用RT-PCR检测细胞中iNOS、CD206的mRNA表达变化;最后应用RT-PCR及Western blot实验检测4组细胞中NLRP3/IL-1β信号通路中NLRP3、IL-1β及Caspase-1的mRNA及蛋白表达变化。结果 ELISA实验显示,异丙酚能够明显抑制LPS所诱导的AMs对促炎因子IL-1β、TNF-α的分泌,且促进细胞对抑炎因子IL-10的分泌;细... 

【文章来源】：免疫学杂志. 2020,36(07)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

异丙酚抑制LPS诱导的AMs对促炎因子IL-1β、TNF-α的分泌并促进细胞对抑炎因子IL-10的分泌

图1 异丙酚抑制LPS诱导的AMs对促炎因子IL-1β、TNF-α的分泌并促进细胞对抑炎因子IL-10的分泌2.3 异丙酚抑制LPS诱导的AMs中NLRP3/IL-1 β信号通路的表达

应用RT-PCR及Western blot实验检测异丙酚对LPS诱导的AMs中NLRP3/IL-1β信号通路的mRNA及蛋白表达影响。RT-PCR实验结果显示与control组相比，LPS组炎症小体NLRP3、IL-1β及Caspase-1的mRNA表达均显著增加（P<0.01),LPS+P组、P组细胞中三者mRNA表达均无明显变化（P>0.05），与LPS组相比，LPS+P组AMs中NLRP3、IL-1β及Caspase-1的mRNA表达明显降低（P<0.05），见图3a;Westernblot实验结果显示与control组相比，LPS组炎症小体NLRP3、IL-1β及Caspase-1的蛋白表达均显著增加（P<0.01),LPS+P组、P组细胞中三者蛋白表达均无明显变化（P>0.05），与LPS组相比，LPS+P组AMs中NLRP3、IL-1β及Caspase-1的蛋白表达均明显降低（P<0.05），见图3b。3 讨论


本文编号：3379876