新型载药蒙脱石复合微球滴眼剂的刺激性及角膜前滞留时间的荧光示踪法考察

发布时间：2021-09-19 04:41

　　目的:将阳离子型药物盐酸倍他洛尔（BH）,与具有离子交换性能的蒙脱石及聚丙烯酸树脂联合使用制备新型盐酸倍他洛尔/蒙脱石聚丙烯酸树脂微球（Mt-BH-MP）新型眼用微纳米混悬剂,考察其刺激性及眼前端滞留能力。方法:采用油包油乳化-溶剂挥发法制备微球,以BH水溶液和市售贝特舒为对照,分别采用永生化人角膜上皮细胞（iHCECs）构筑角膜前滞留的细胞模型和荧光示踪法评价Mt-BH-MP在细胞模型及兔眼眼表的滞留能力;以MTT法、兔眼眨眼实验及角膜荧光损失来共同评价该新型给药系统的刺激性。结果:iHCECs细胞模型角膜前滞留实验结果表明,Mt-BH-MP的眼部滞留能力明显优于贝特舒组和BH水溶液组;Mt-BH-MP兔眼在体角膜前荧光可维持（46±1） min,亦明显长于BH水溶液和贝特舒滴眼液组（P<0.05）,上述二项实验结果一致。MTT实验结果显示,iHCECs与各制剂接触2 h后,细胞存活率大小顺序为:空白微球>Mt-BH-MP> BH水溶液>贝特舒;兔眼眨眼刺激性及荧光角膜损伤实验结果表明,Mt-BH-MP给药后并无明显异物感及角膜机械损伤。结论:制备的新型微球眼... 

【文章来源】：中国医院药学杂志. 2020,40(03)北大核心

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

Mt-BH-MP(A)和眼用混悬液中Mt-BH-MP(B)的显微图(40×)

将一定量的含Mt-BH-MP的细胞液、含BH标准品的细胞液、空白细胞液用0.22 μm微孔滤膜过滤,测定其色谱图,并进行比较,考察细胞液是否影响对BH的检测,结果见图2。由图2可知,模型药BH的保留时间为 6.181 min,空白细胞液在BH样品出峰时间处无干扰,专属性强,而且BH样品峰形良好、分离度好,该方法可以用于细胞液样品中BH含量的测定。

角膜前滞留Transwell板供给池中加入500 μL鼠尾胶原蛋白Ⅰ型溶液,待溶剂挥发后加入200 μL人纤连蛋白溶液,弃掉废液,PBS清洗。将细胞以每孔1×105cells接种于处理过的Transwell板上,加入1 mL培养液于供给池中,向吸收池加入1.5 mL培养液,培养7 d,减少吸收池培养液,以形成气液界面有利于复层细胞形成,继续培养12 h ,取下Transwell板底部,进行冷冻切片,滴加DAPI进行细胞核染色,荧光显微镜观察。将封口膜封底的Transwell板至于恒温振荡器中,于34 ℃、120 r·min-1条件下恒温振荡,并加入一定量Mt-BH-MP混悬液与人工泪液的混合溶液,并通过注射泵,以20 μL·min-1的速度注入人工泪液,同时,另一端以相同的速度吸取人工泪液,如图3所示。每隔10 min回收200 μL吸取泵中的人工泪液,并测定其中的药物浓度,以时间为横坐标,药物浓度为横坐标,绘制药物角膜前清除速率曲线。结果如图4所示。

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3401036