5,6,7—三甲氧基黄酮水杨酸甲酯衍生物的设计、合成及抗肿瘤活性研究

发布时间：2021-10-09 12:47

　　目的:本题基于药效团拼合原理,设计、合成含三甲氧基苯基的黄酮水杨酸甲酯衍生物,初步探究其抗肿瘤活性及作用机制,期望筛选出同时对肿瘤的血管生长和糖酵解水平均有抑制作用的优良抗肿瘤先导化合物。方法:以3,4,5-三甲氧基苯酚为起始原料,合成得到5,6,7-三甲氧基-4’-羟基黄酮,再分别通过1,2-二溴乙烷、1,3-二溴丙烷、1,4-二溴丁烷连接系列水杨酸甲酯衍生物,所得产物通过硅胶柱层析法进行纯化,最终得到24个新型目标化合物,通过熔点测定（M.P.）、核磁共振氢谱（¹ H NMR）、碳谱（¹33 C NMR）和质谱（MS）等手段进行了结构确认。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法测定24个目标化合物对人胃癌细胞（SGC-7901、MGC-803、HGC-27）、人结肠癌细胞（HCT-116）、人肝癌细胞（BEL-7402）的抗增殖活性以及对正常的人胃粘膜细胞（GES-1）的细胞毒性,比较初步的MTT测定实验结果,筛选出目标化合物7f对人胃癌细胞（HGC-27）做进一步的抗肿瘤活性及其作用机制研究。采用细胞集落实验和划痕实验测定目标化合物7f对H... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：127 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

微管蛋白自组装过程示意图

9取代基的水杨酸甲酯衍生物，期望筛选得到同时对肿瘤细胞血管与糖酵解水平均有抑制作用的优良抗肿瘤先导化合物。如图1.5通过拼合原理设计的目标5,6,7-三甲氧基黄酮水杨酸甲酯衍生物。

343.4化合物7f对HGC-27细胞集落形成的影响肿瘤细胞通过自身无限增殖，获得形成集落的能力，而高度分化成熟的细胞不具备这种增殖能力，因此，肿瘤细胞集落形成效率的差异反映着肿瘤细胞体外独立生存能力的强弱。平板细胞克隆技术是检测细胞增殖能力的有效方法之一，在本节中，采用此技术测定化合物7f对HGC-27细胞集落形成的影响。3.4.1平板细胞克隆实验首先取HGC-27单细胞悬液以1500个细胞每孔的密度接种在6孔培养板中，加入适量新鲜培养液，然后在37℃，含5%CO2的培养箱中孵育24h；更换含有不同浓度化合物7f（2、4、8μM）的新鲜培养液后，其中未加药物仅含0.1%DMSO的新鲜培养液作为对照组。平均三天更换一次培养液，共同孵育9天后，弃去培养液，用PBS洗涤两次，形成的菌落用4%多聚甲醛（Paraformaldehyde，POM）固定15min，然后在室温下用0.1%结晶紫染色15min，再次用PBS洗涤多次后，将平板中的菌落干燥并拍照。3.4.2化合物7f抑制HGC-27细胞集落的形成通过集落实验成功测定了化合物7f对HGC-27细胞的增殖能力的影响，结果如图3.1所示，加药组中不同浓度的7f（2、4、8μM）与空白对照组相比较，发现随着加药浓度的不断增加，培养皿中结晶紫的面积越来越少，并且颜色也逐渐变浅，甚至当化合物7f加药浓度为8μM时，结晶紫几乎完全消失。结果表明化合物7f能够以剂量依赖性方式显著地抑制胃癌HGC-27细胞的体外生长。图3.1化合物7f抑制HGC-27细胞的集落形成

【参考文献】：
期刊论文
[1]黄酮类化合物的研究进展[J]. 彭程程,王青山,赵国祥,邓放明.  农产品加工(学刊). 2010(05)
[2]Mechanisms underlying aspirin-mediated growth inhibition and apoptosis induction of cyclooxygenase-2 negative colon cancer cell line SW480[J]. Ming-Yu Lai, Jie-An Huang,Zhi-Hai Liang, Hai-Xing Jiang, Guo-Du Tang,Department of Gastroenterology, First Affiliated Hospital, Guangxi Medical University,Nanning 530021, Guangxi Zhuang Autonomous Region,China.  World Journal of Gastroenterology. 2008(26)
[3]黄酮类化合物抗肿瘤作用研究进展[J]. 黄华艺,查锡良.  中国新药与临床杂志. 2002(07)



本文编号：3426410