孔鳐鱼硫酸软骨素寡糖制备工艺优化及抗氧化活性研究

发布时间：2021-10-17 01:16

　　目的本研究以孔鳐鱼为原材料,探究其中硫酸软骨素寡糖的提取、分离及纯化工艺,并对各级产物进行了产率、分子量、抗氧化活性等多方面的对比,响应面法确定稀碱酶法最优工艺条件,为硫酸软骨素寡糖的研究发展提供实验依据。方法先分别用浓碱法、碱盐法以及稀碱法三种不同提取工艺对孔鳐鱼软骨进行硫酸软骨素的提取,之后再通过分析产品得率、氨基己糖和氮杂质的含量来比对三种工艺所得成品的质量区别,以寻找最佳的提取工艺。用响应面法确定稀碱酶法的最佳工艺条件。此后以碱盐法所提取到的硫酸软骨素成品为材料,做进一步的降解、分级分离和纯化,以获得纯度较高的单一组分的硫酸软骨素寡糖。在降解时采用了酶解和酸解两种方式,通过对比降解产物的生物活性来确定酶解产物进入下一级的分离纯化。同时对酶解时间进行了考察,确定5.5h为最佳酶解时间。此后以酶解5.5h的硫酸软骨素寡糖的初级产物为原料,建立分级分离纯化体系。在逐步经过凝胶过滤分离、阴离子交换分离、制备电泳分离和AKTA superdex peptide柱分离后得到组分相对比较单一的高纯度硫酸软骨素寡糖。在这一过程中,对每一级的分离产物都进行分子量和抗氧化活性的检测。用响应面法确定... 

【文章来源】：锦州医科大学辽宁省

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

不同制备工艺所得硫酸软骨素成品的产品得率

结果和讨论三种制备工艺所得产品得率结果如下：图 1 不同制备工艺所得硫酸软骨素成品的产品得率如上图，经重复三次碱盐法所获得的硫酸软骨素成品 B 得率最44.7%。三种制备工艺所得氨基己糖含量比较结果如下：

图 3 三种制备工艺所得硫酸软骨素成品氮含量比较如上图所示，经重复三次浓碱法所得成品中氮含量最低，说最高，而碱盐法所得成品 B 的氮含量 2.8%略高于浓碱法的成准范围内，而且二者差异并不大。考虑到高浓度的碱溶液对性影响较大，综合之下我们认为，在三种制备工艺中，碱盐因此接下去的实验步骤均使用硫酸软骨素成品 B。若干份等量的孔鳐鱼软骨原料，分别在不同的碱提时间下进法提取。按照碱提时间将实验分成 1h、2h、3h、4h、5h 这盐法提取 3 次，分别计算得率后取平均值记录，结果如下：

【参考文献】：
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本文编号：3440841