离子液体对细胞/组织构建物体外临界毒性研究

发布时间：2021-10-22 11:37

　　离子液体（Ionic liquids,ILs）由阴阳离子构成,在100℃以下呈液体状态,也叫作室温熔融盐。近年来,离子液体的研究一直是科研热点,其在工业领域有着广泛的应用,但是离子液体的“风险”也越来越受人关注。离子液体环境风险评估的一个重要环节是其生物毒性测定,但离子液体的毒性根据作用对象的不同而各异。通过使用大量不同类型的离子液体对各种生命层次和类型进行毒性/毒理实验研究,填补其毒性数据空白,探究其毒性机理,能更好地判定离子液体对整个环境生态系统及生物体系的影响,并能为设计无毒且满足各种功能需求的新型离子液体奠定理论和实验基础。本研究采用“两步合成法”制备1-乙基-3-甲基咪唑二乙基磷酸盐（[Emim]DEP）并配置[Emim]DEP-基础培养基混合溶液用于小鼠颅顶前成骨细胞系（MC3T3-E1）的细胞毒性检测。由MTT试验可知,在细胞二维（Two dimensional,2D）层面上[Emim]DEP型离子液体对MC3T3-E1细胞的增殖有抑制作用,且该作用具有时间相关性以及浓度相关性,随作用时间和作用浓度增加该抑制作用均明显增强。由离子液体的抑制率-浓度拟合曲线可知,[Emim... 

【文章来源】：大连理工大学辽宁省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：80 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
1 文献综述
    1.1 离子液体的概述
        1.1.1 离子液体的定义
        1.1.2 离子液体的发展史
        1.1.3 离子液体的结构与分类
        1.1.4 离子液体的制备方法
        1.1.5 离子液体的应用
        1.1.6 离子液体的毒性
        1.1.7 离子液体毒性评估方法
    1.2 组织工程概述
        1.2.1 组织工程定义
        1.2.2 支架材料的选择
        1.2.3 支架材料的种类
    1.3 选题依据及研究目的
2 离子液体的细胞毒性
    2.1 实验材料与仪器
        2.1.1 实验材料
        2.1.2 实验仪器
        2.1.3 实验所需试剂的配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 制备[Emim]DEP型离子液体
        2.2.2 [Emim]DEP型离子液体毒性预实验
        2.2.3 MTT实验
        2.2.4 Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测
        2.2.5 复合荧光染色
        2.2.6 苏木精-伊红染色
        2.2.7 扫描电镜
        2.2.8 低浓度离子液体对细胞分化作用影响
        2.2.9 统计分析
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 [Emim]DEP型离子液体的表征
        2.3.2 密度预实验
        2.3.3 浓度预实验
        2.3.4 MTT实验检测[Emim]DEP型离子液体的IC_(50)
        2.3.5 Annexin V-FITC/PI半定量检测细胞凋亡
        2.3.6 复合荧光染色观察离子液体对细胞增值的抑制作用
        2.3.7 苏木精-伊红染色法观察离子液体对细胞形态的影响
        2.3.8 扫描电镜观察离子液体对细胞形态的影响
        2.3.9 低浓度离子液体对细胞分化作用影响
    2.4 本章小结
3 离子液体对组织构建物的毒性
    3.1 实验材料与仪器
        3.1.1 实验材料
        3.1.2 实验仪器
    3.2 体外3D立体细胞模型构建
        3.2.1 支架材料的制备
        3.2.2 支架材料的微观形貌检测
        3.2.3 支架材料的力学性能检测
        3.2.4 支架材料的吸水率测定
        3.2.5 支架材料的孔隙率测定
        3.2.6 支架材料的生物相容性检测
    3.3 离子液体三维层面上的细胞毒性检测
        3.3.1 MTT实验
        3.3.2 复合荧光染色
        3.3.3 扫描电镜实验
    3.4 统计分析
    3.5 结果与讨论
        3.5.1 支架材料的微观形貌
        3.5.2 支架材料的力学性能
        3.5.3 支架材料的孔隙率与吸水率
        3.5.4 支架材料的生物相容性
        3.5.5 离子液体对三维层面上细胞作用的IC_(50)
        3.5.6 复合荧光染色观察三维层面上细胞死活
        3.5.7 离子液体作用后三维层面上的细胞微观形态
    3.6 本章小结
结论
参考文献
附录A 缩略语
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]生物可降解离子液体预处理玉米秸秆[J]. 李姗,徐俊丽,康莹,朱敏莉,辛加余,李增喜,吕兴梅.  中国科学:化学. 2019(07)
[2]基于离子液体溶解-超临界干燥技术制备纤维素基气凝胶材料的研究进展[J]. 余坚,米勤勇,袁斌,张军.  中国材料进展. 2019(01)
[3]吡啶类离子液体在沙棘叶总黄酮提取中的应用研究[J]. 赵三虎,王鸣姗,乔永生,董智云,刘改梅.  化学试剂. 2018(09)
[4]离子液体研究与发展[J]. 王忠华.  乙醛醋酸化工. 2018(09)
[5]离子液体对钙钛矿太阳能电池性能的影响[J]. 赵利萍,王震,董献堆.  应用化学. 2018(02)
[6]咪唑型离子液体对小鼠的急性毒性[J]. 徐红梅,田芳,靳丹萍,丁运生,张威,严国林,杨珍,卓彩虹.  环境科学学报. 2011(02)

博士论文
[1]离子液体泡沫浮选在食品除草剂残留测定中的应用[D]. 张丽媛.吉林大学 2016
[2]固载离子液体吸附剂在食品中农兽药萃取的应用[D]. 任瑞冰.吉林大学 2012



本文编号：3451022