基于氮唑类抗真菌药物设计合成的荧光探针及其真菌细胞成像应用

发布时间：2021-10-25 05:51

　　氮唑类抗真菌药物作用靶点是羊毛甾醇14-α去甲基化酶（sterol 14α-demethylase,又名CYP51）。准确探究氮唑类药物与CYP51酶的结合模式,有利于从靶酶角度设计合成活性更好的化合物。利用小分子荧光探针技术,与药物偶联,作为一种可视化工具,可对药物在细胞内的分布、与靶点结合或相互作用情况进行示踪。然而部分小分子荧光染料自身存在一些不足:1.脂溶性差,不易透过细胞膜,进入真菌细胞;2.染料发射光谱位于紫外及可见光区,而生物体及其组织在可见光的激发下自身会发射荧光,导致严重背景干扰,不适于细胞生物成像;3.染料始终带有荧光,需要洗去以降低背景,应用步骤繁琐,成像信噪比低。本文的研究目的是设计合成基于氮唑类抗真菌药物的小分子荧光探针用于真菌细胞CYP51酶成像并利用探针工具初步建立一种体外筛选化合物抗真菌活性的新方法。新型的硅基罗丹明染料,在保留传统罗丹明染料成像优点的同时,通过硅原子取代桥连氧原子,使自身发射波长红移至近红外光区（600⁹00 nm）从而适用于生物成像。我们在其基础上引入内酯螺环,合成出一种具有荧光“关-开”机制的新型探针。即未与靶... 

【文章来源】：中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校

【文章页数】：82 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

CYP51催化羊毛甾醇碳14-位去甲基化

从而获取目标物浓度变化、时空分布等相关化学生物信息。生物样本成像中，本体或组织在可见光的激发下自身会产生荧光激发自身的荧光发射波长大部分处在可见或紫外光区域，导致两者荧光相响了样品的检测和造影，例如胆红素和还原性烟酰胺嘌呤二核苷酸PH）的荧光波长范围为 430～470 nm[19]，血浆中血清蛋白的荧光波长50 nm[20]，故使得可见光区域的荧光分析法灵敏性、准确性受到了较大较于发射光光谱处在可见及紫外光区的信号分子，近红外荧光探针因其力强、信噪比高、对基体损伤小等突出优势，在生物分析领域备受瞩在尽可能保留罗丹明优点的同时，设计、改善其结构，使其最大吸收和至近红外光区（650～900 nm），得到一类信噪比高、生物兼容性好的近染料，便成了亟待解决的问题。丹明染料以氧杂蒽环为基本母核，2008 年 Fu 等[22]将焦宁 Pyronine Y 原子替换成二甲基硅，合成了新型的硅杂蒽环染料 TMDHS（见图 3硅后，TMDHS 的吸收和发射光谱发生了 90 nm 的红移。

基于氮唑类抗真菌药物设计合成的荧光探针及其真菌细胞成像应传统的罗丹明衍生物包括罗丹明 6G、罗丹明 101、罗丹明 B 的吸收/发射波长见光区（500～600 nm），不适合生物体荧光成像。对生物成像来说，将苯基引入杂蒽环上便于控制探针的荧光性质，既可提供适宜的标记位点扩大底物范围，又过立体位阻稳定染料，避免环境中亲和物质影响。利用此原理，2011 年 Nagano3]，合成发展了硅基取代的罗丹明类似物，并命名为硅基罗丹明 SiR（见图 4）。将 SiR700 与单克隆抗体偶联，实现了小鼠恶性神经胶质瘤的靶向近红外荧光成像


本文编号：3456778