miR-29a抑制血管内皮细胞增殖的机制研究

发布时间：2021-10-29 16:08

　　目的研究miR-29a通过调控丝裂原活化蛋白激酶（Mitogen-Activated Protein Kinase,MAPK）信号通路抑制血管内皮细胞增殖的机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs）,待细胞生长至对数期时将细胞分为miR-29a mimic组（转染miR-29a mimic）和miR-29a NC组（转染miR-29a NC）。培养24 h后,用实时荧光定量聚合酶链反应（Quantitative Real-time PCR）检测血管内皮细胞中miR-29a的表达,以噻唑蓝（MTT）法检测血管内皮细胞的细胞活力,以5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷（5-ethynyl-2’-deoxyuridine,EdU）染色检测血管内皮细胞的增殖情况,以流式细胞仪检测细胞的周期,以蛋白质印迹法（Western Blot）检测细胞中B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）、Bcl-2相关蛋白（Bcl-2-associated X protein,Bax）、细胞周期蛋白激酶（Cyclin-Dependent Kinase 4,CDK 4）、细胞周期蛋白激酶（... 

【文章来源】：中国临床药理学杂志. 2020,36(18)北大核心CSCD

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
材料与方法
    1 材料
    2 方法
        2.1 内皮细胞的培养
        2.2 以qRT-PCR检测人脐静脉内皮细胞中miR-29a的表达[5]
        2.3 以MTT法检测人脐静脉内皮细胞活力[6]
        2.4 以流式细胞术检测人脐静脉内皮细胞周期[7]
        2.5 以蛋白质印迹法检测人脐静脉内皮细胞中蛋白的表达[8]
    3 统计学处理
结 果
    1 miR-29a mimic转染的验证
    2 miR-29a mimic对人脐静脉内皮细胞活力、增殖及细胞周期的影响
    3 miR-29a mimic对人脐静脉内皮细胞的细胞凋亡情况和细胞周期及细胞凋亡相关蛋白表达的影响
    4 miR-29a mimic对人脐静脉内皮细胞中MAPK信号通路的影响
讨 论



本文编号：3464968