表达长效重组人生长激素-Fc融合蛋白的CHO细胞培养工艺的优化及放大

发布时间：2021-11-05 22:15

　　目的优化表达长效重组人生长激素-Fc(recombiant human growth hormone-Fc,rhGH-Fc)融合蛋白的CHO细胞培养工艺,并进行初步工艺放大。方法采用7 L生物反应器培养表达rhGH-Fc融合蛋白的CHO细胞,操作参数:转速200 r/min,温度37℃,pH 7.2±0.1,溶氧值(DO)40%。通过改变对数增长期的pH(7.2±0.1降至6.9±0.1)及平台期降温幅度(37℃降至30及33℃),检测培养过程中细胞密度、细胞活率、培养液渗透压、葡萄糖及乳酸水平、以蛋白表达量为指标,优化7 L生物反应器培养工艺。应用优化的最佳工艺进行14 L线性放大,通气量分别设置为0.5、0.1及0.03 SLPM,检测蛋白表达量。结果 7 L生物反应器培养工艺最佳pH为6.9±0.1,最佳温度为33℃,该工艺下蛋白表达量高达1 200 mg/L;14 L生物反应器培养工艺最佳通气量为0.03 SLPM,该工艺下蛋白表达量为880 mg/L。结论成功优化了表达rhGH-Fc融合蛋白的CHO细胞7 L生物反应器的培养工艺,并实现了14 L生物反应器的放大,本实验为后续...

【文章来源】： 中国生物制品学杂志. 2020,33(10)CSCD

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 细胞株
    1.2 主要试剂及仪器
    1.3 细胞复苏
    1.4细胞种子液的制备
    1.5 7 L生物反应器的培养
    1.6 7 L生物反应器工艺的优化
    1.7 蛋白表达量的测定
    1.8 14 L生物反应器的工艺放大
2 结果
    2.1 最佳7 L生物反应器的工艺条件
        2.1.1 最适培养p H
        2.1.2 最适培养温度
    2.2 14 L生物反应器的工艺放大结果
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]pH对重组CHO细胞生长、单抗表达及质量的影响 [J]. 肖尚,邓崇飞,柯军,鄢成伟,孙文正,杨彬.  生物技术通报. 2015(12)
[2]长效蛋白生物药研究进展 [J]. 梁成罡,王军志.  中国新药杂志. 2014(20)



本文编号：3478604