吉西他滨和髓细胞白血病基因1小干扰RNA纳米药物的制备和表征

发布时间：2021-11-13 05:08

　　目的研究利用生物相容性的磷脂-阳离子聚合物（LENP）混合型纳米载体共同递送吉西他滨（Gem）和髓细胞白血病基因1（MCL-1）小干扰RNA（siRNA）（siMCL-1）,制备治疗胰腺癌的纳米药物LENPGem-siMCL-1。方法用复乳法合成LENP-Gem-siMCL-1核心,Gem包裹在亲水性核心,表面正电荷通过静电吸附siRNA;核心外面的磷脂层通过超声薄膜法进行自组装。纳米粒度及Zeta电位分析仪测量纳米颗粒的粒径分布和表面电位;透射电镜观察纳米颗粒的内部结构;高效液相色谱测量纳米载体对Gem的包封率;激光共聚焦显微镜观察胰腺癌细胞PANC-1对LENP-羧基荧光素（FAM）-siMCL-1的摄取,Western印迹法检测PANC-1细胞中MCL-1蛋白表达水平。以LENP-Gem-siMCL-1（Gem终浓度为32μmol·L-1）与胰腺癌PANC-1和BxPC-3细胞培养48 h,MTT法测定细胞存活率。结果制备的纳米药物LENP-GemsiMCL-1为结构和大小分布均匀的球形粒子,具有典型的核壳结构,粒径约200 nm,表面电位为-22.6 mV。Gem的包封率达到2... 

【文章来源】：中国药理学与毒理学杂志. 2020,34(08)北大核心

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 细胞、试剂和仪器
    1.2 LENP-Gem-si RNA的制备
    1.3 纳米粒度和Zeta电位分析仪测量纳米颗粒的粒径分布和表面电位
    1.4 透射电镜观察纳米颗粒的内部结构
    1.5 高效液相色谱（HPLC）测定LENP对Gem的包封率
    1.6 共聚焦显微镜检测LENP对si RNA的输运作用
    1.7 Western印迹法检测PANC-1细胞MCL-1蛋白表达
    1.8 MTT法测定PANC-1和Bx PC-3癌细胞存活率
    1.9 统计学分析
2 结果
    2.1 纳米颗粒粒径分布、Zeta电位、电镜结构和包封率的表征
    2.2 LENP对si RNA的输运作用
    2.3 LENP-si MCL-1抑制胰腺癌细胞MCL-1蛋白表达
    2.4 LENP-Gem-si MCL-1明显抑制胰腺癌细胞存活
3 讨论



本文编号：3492383