非诺贝特在兔角膜新生血管中的实验研究
发布时间:2017-05-10 02:06
本文关键词:非诺贝特在兔角膜新生血管中的实验研究,由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】:目的:通过非诺贝特对兔角膜碱烧伤模型的实验研究,以进一步探索调脂药在兔眼角膜新生血管治疗中的作用,从而为临床上非诺贝特对角膜新生血管的治疗提供依据。方法:选取健康的新西兰大白兔34只,雌雄不限,体重1.5-2kg左右,2只作为正常对照组,余32只兔的右眼制作碱烧伤模型。碱烧伤模型制作成功后分为A、B、C、D四组,每组各8只。A组(对照组):d1-d14口服安慰剂;B组(治疗组):d1-d7口服安慰剂,d8-d14天口服非诺贝特;C组(预防组):d1-d7口服非诺贝特,d8-d14停服非诺贝特,改口服安慰剂;D组(混合组):d1-d14口服非诺贝特;分别于术后d1、d4、d7、d14天观察眼前节结膜充血、角膜浑浊、角膜新生血管、炎症及角膜上皮修复情况,并于第7天和第14天各组分别处死4只兔子,分别取右眼碱烧伤角膜组织行免疫组化观察ɑ-SMA、TGF-β、K3/K12、CD31和VEGF抗体的表达情况。结果:1.角膜新生血管在碱烧伤后10天内生长迅速,14天时新生血管趋于相对稳定状态。各时间点比较C、D组新生血管面积较A、B组比较均有统计学意义,A、B组之间比较无统计学意义。C、D组之间在第14天时比较有统计学意义。2.免疫组化荧光染色结果显示:a-SMA、TGF-β、CD31在正常角膜中无表达,K3/K12只在角膜上皮细胞中表达。VEGF大部分在角膜上皮中表达,造模后a-SMA、TGF-β、CD31及VEGF在各组均有表达,不同时间点表达量在各组中存在差异。K3/K12在正常角膜、非诺贝特预防组和混合组角膜上皮中全层连续表达,而在对照组及治疗组中仅部分层次表达,表达不连续。结论:1.非诺贝特对碱烧伤后兔角膜新生血管的形成有一定的预防作用,治疗作用效果不显著,对新生血管的产生持续用药优于单纯预防用药。2.预防性使用非诺贝特能上调兔角膜碱烧伤后角膜中K3/K12的表达,同时下调a-SMA、TGF-β、CD31和VEGF的表达。3.非诺贝特在角膜损伤后能抑制角膜基质细胞向肌成纤维细胞的分化,减少角膜瘢痕的形成。
【关键词】:非诺贝特 角膜 新生血管 免疫组织化学 HE
【学位授予单位】:南昌大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R965
【目录】:
- 摘要4-6
- ABSTRACT6-10
- 中英文缩略词表10-11
- 第1章 引言11-13
- 1.1 概述11
- 1.2 研究现状11-13
- 第2章 材料与方法13-19
- 2.1 材料13-14
- 2.1.1 实验动物13
- 2.1.2 主要试剂13
- 2.1.3 实验仪器、设备13-14
- 2.2 实验方法14-15
- 2.2.1 兔眼碱烧伤模型的制作14
- 2.2.2 实验分组14-15
- 2.2.3 治疗方法15
- 2.3 术后观察指标15-16
- 2.3.1 角、结膜反应及睑球粘连情况15-16
- 2.3.2 新生血管与炎症16
- 2.3.3 角膜上皮损伤的测定16
- 2.4 组织病理学观察16-18
- 2.4.1 免疫荧光化学染色17
- 2.4.2 苏木精-伊红染色(HE染色)17-18
- 2.5 统计学分析18-19
- 第3章 结果19-41
- 3.1 睑球粘连、结膜、角膜混浊情况19
- 3.2 角膜新生血管生长情况19-23
- 3.3 碱烧伤后角膜HE染色情况23-24
- 3.4 角膜组织中 ɑ-SMA的表达情况24-27
- 3.5 角膜组织中TGF—β 的表达情况27-30
- 3.6 角膜组织中CD31 的表达情况30-33
- 3.7 角膜上皮中K3/K12 的表达情况33-36
- 3.8 角膜组织中VEGF的表达情况36-41
- 第4章 讨论41-44
- 第5章 结论与展望44-45
- 致谢45-46
- 参考文献46-49
- 攻读学位期间研究成果49-50
- 综述50-54
- 参考文献53-54
【参考文献】
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,本文编号:353767
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