脂多糖通过TLR4-MyD88信号通路诱导BV2小胶质细胞激活模型的建立

发布时间：2021-12-29 10:09

　　目的探讨不同活化程度的BV2小胶质细胞与炎性介质之间的关系及可能的细胞信号转导途径,建立高效稳定的BV2小胶质细胞激活模型。方法体外常规培养BV2小胶质细胞,CCK-8法绘制细胞生长曲线;采用不同浓度的脂多糖（LPS）（0.25、0.5、1、2、4μg/mL）诱导BV2小胶质细胞24 h,倒置相差显微镜下观察细胞形态变化;应用CCK-8法和Griess法分别检测细胞活性和一氧化氮（NO）水平;应用蛋白质印迹法（Western blot）和实时荧光定量PCR（qRT-PCR）分别检测Toll样受体4（TLR4）、髓样分化因子88（MyD88）蛋白和mRNA的表达。同时选取浓度为1μg/mL的LPS诱导BV2小胶质细胞24 h,应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞培养上清液中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）浓度。结果 CCK-8法和Griess法结果显示:BV2小胶质细胞传代培养后第2～3天处于对数生长期;LPS能明显降低BV2小胶质细胞存活率及提高NO释放量（均P<0.05）,且在实验剂量范围内呈现剂量-效应关系。Western blot和qRT-... 

【文章来源】：华中科技大学学报(医学版). 2020,49(01)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

BV2小胶质细胞生长曲线

静息状态BV2细胞形态(×100)

激活状态BV2细胞形态(×100)


本文编号：3555916