Pam3CSK4增强GM-CSF诱导的中性粒细胞对MRSA的杀菌功能及机制研究
发布时间：2022-01-08 14:08
目的:Pam3CSK4是人工合成TLR2（Toll-like receptor 2）配基,可以通过TLR2影响中性粒细胞（polymorphonuclear neutrophil,PMN）功能,本课题应用Pam3CSK4预处理GM-CSF诱导的小鼠骨髓中性粒细胞,探讨预处理后的中性粒细胞对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin resistant staphylococcus aureus,MRSA）杀菌抑菌功能的影响,并初步探讨其相关机制,为MRSA的免疫学防治提供新思路。方法:1、Pam3CSK4预处理GM-CSF诱导的中性粒细胞24h、48h后,流式检测预处理后中性粒细胞对FITC标记的热灭活耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（heatkilled methicillin resistant staphylococcus aureus,HK-MRSA）、热灭活大肠埃希菌（heat-killed Escherichia coli,HK-E.coli）的吞噬作用;用平板计数法检测Pam3CSK4预处理24h、48h的中性粒细胞对MRSA、E.coli的杀菌或抑菌功能。2、Transw...
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
第1章 引言
第2章 材料与方法
2.1 实验动物、试剂与设备
2.1.1 实验动物及菌株
2.1.2 主要的实验试剂
2.1.3 主要的实验设备
2.1.4 主要的试剂配制
2.2 实验方法
2.2.1 小鼠骨髓细胞制备
2.2.2 MRSA及FITC标记的HK-MRSA的制备
2.2.3 磁珠分选中性粒细胞
2.2.4 GM-CSF诱导中性粒细胞细胞形态检测
2.2.5 Pam3CSK4预处理后中性粒细胞吞噬功能检测
2.2.6 Pam3CSK4预处理后中性粒细胞杀菌抑菌功能检测
2.2.7 Pam3CSK4预处理后中性粒细胞趋化功能检测
2.2.8 Pam3CSK4预处理后中性粒细胞脱颗粒检测
2.2.9 Pam3CSK4预处理后中性粒细胞呼吸爆发检测
2.2.10 Pam3CSK4预处理后中性粒细胞炎症细胞因子检测
2.2.11 Pam3CSK4对中性粒细胞细胞因子mRNA表达的影响
2.2.12 Pam3CSK4对中性粒细胞信号通路调控的检测
2.2.13 MAPK,PI3K通路抑制剂对中性粒细胞吞噬及杀菌功能的抑制作用
2.2.14 MAPK,PI3K通路抑制剂对中性粒细胞呼吸爆发的抑制作用
2.2.15 MAPK,PI3K通路抑制剂对中性粒细胞脱颗粒的抑制作用…
2.2.16 统计学分析
第3章 结果
3.1 GM-CSF诱导中性粒细胞纯度及形态测定
3.2 Pam3CSK4预处理对中性粒细胞吞噬功能的影响
3.3 Pam3CSK4预处理对中性粒细胞杀菌功能的影响
3.4 Pam3CSK4预处理对中性粒细胞趋化功能的影响
3.5 Pam3CSK4预处理对中性粒细胞脱颗粒的影响
3.6 Pam3CSK4预处理对中性粒细胞呼吸爆发的影响
3.7 Pam3CSK4预处理对中性粒细胞细胞因子表达的影响
3.8 Pam3CSK4预处理中性粒细胞对信号通路蛋白的影响
3.9 信号通路抑制剂对Pam3CSK4介导的中性粒细胞功能的影响
第4章 讨论
第5章 结论
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
综 述 TLRs 调节中性粒细胞抗菌免疫功能研究现状
参考文献 (References)
【参考文献】：
期刊论文
[1]2015年CHINET细菌耐药性监测[J]. 胡付品,朱德妹,汪复,蒋晓飞,徐英春,张小江,张朝霞,季萍,谢轶,康梅,王传清,王爱敏,徐元宏,沈继录,孙自镛,陈中举,倪语星,孙景勇,褚云卓,田素飞,胡志东,李金,俞云松,林洁,单斌,杜艳,郭素芳,魏莲花,吴玲,张泓,王春,胡云建,艾效曼,卓超,苏丹虹,汪瑞忠,房华,俞碧霞,赵勇,龚萍. 中国感染与化疗杂志. 2016(06)
[2]成年大面积烧伤死亡患者的细菌感染及耐药情况分析[J]. 邓呈亮,詹日兴,刘洋,郭小伟,吴军,彭毅志,罗高兴. 中华烧伤杂志. 2016 (11)
本文编号：3576693
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
第1章 引言
第2章 材料与方法
2.1 实验动物、试剂与设备
2.1.1 实验动物及菌株
2.1.2 主要的实验试剂
2.1.3 主要的实验设备
2.1.4 主要的试剂配制
2.2 实验方法
2.2.1 小鼠骨髓细胞制备
2.2.2 MRSA及FITC标记的HK-MRSA的制备
2.2.3 磁珠分选中性粒细胞
2.2.4 GM-CSF诱导中性粒细胞细胞形态检测
2.2.5 Pam3CSK4预处理后中性粒细胞吞噬功能检测
2.2.6 Pam3CSK4预处理后中性粒细胞杀菌抑菌功能检测
2.2.7 Pam3CSK4预处理后中性粒细胞趋化功能检测
2.2.8 Pam3CSK4预处理后中性粒细胞脱颗粒检测
2.2.9 Pam3CSK4预处理后中性粒细胞呼吸爆发检测
2.2.10 Pam3CSK4预处理后中性粒细胞炎症细胞因子检测
2.2.11 Pam3CSK4对中性粒细胞细胞因子mRNA表达的影响
2.2.12 Pam3CSK4对中性粒细胞信号通路调控的检测
2.2.13 MAPK,PI3K通路抑制剂对中性粒细胞吞噬及杀菌功能的抑制作用
2.2.14 MAPK,PI3K通路抑制剂对中性粒细胞呼吸爆发的抑制作用
2.2.15 MAPK,PI3K通路抑制剂对中性粒细胞脱颗粒的抑制作用…
2.2.16 统计学分析
第3章 结果
3.1 GM-CSF诱导中性粒细胞纯度及形态测定
3.2 Pam3CSK4预处理对中性粒细胞吞噬功能的影响
3.3 Pam3CSK4预处理对中性粒细胞杀菌功能的影响
3.4 Pam3CSK4预处理对中性粒细胞趋化功能的影响
3.5 Pam3CSK4预处理对中性粒细胞脱颗粒的影响
3.6 Pam3CSK4预处理对中性粒细胞呼吸爆发的影响
3.7 Pam3CSK4预处理对中性粒细胞细胞因子表达的影响
3.8 Pam3CSK4预处理中性粒细胞对信号通路蛋白的影响
3.9 信号通路抑制剂对Pam3CSK4介导的中性粒细胞功能的影响
第4章 讨论
第5章 结论
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
综 述 TLRs 调节中性粒细胞抗菌免疫功能研究现状
参考文献 (References)
【参考文献】：
期刊论文
[1]2015年CHINET细菌耐药性监测[J]. 胡付品,朱德妹,汪复,蒋晓飞,徐英春,张小江,张朝霞,季萍,谢轶,康梅,王传清,王爱敏,徐元宏,沈继录,孙自镛,陈中举,倪语星,孙景勇,褚云卓,田素飞,胡志东,李金,俞云松,林洁,单斌,杜艳,郭素芳,魏莲花,吴玲,张泓,王春,胡云建,艾效曼,卓超,苏丹虹,汪瑞忠,房华,俞碧霞,赵勇,龚萍. 中国感染与化疗杂志. 2016(06)
[2]成年大面积烧伤死亡患者的细菌感染及耐药情况分析[J]. 邓呈亮,詹日兴,刘洋,郭小伟,吴军,彭毅志,罗高兴. 中华烧伤杂志. 2016 (11)
本文编号：3576693
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