新型佐剂TFPR1作用机制及活性功能区研究

发布时间：2022-01-27 10:33

　　TFPR1是本课题组研发的已获国家专利授权的新型佐剂,是基于竹叶青蛇毒非毒素蛋白Triflin N端的致病相关蛋白1结构域设计而成。前期研究表明TFPR1具有很好的免疫调节活性,与抗原简单混合即可增强其免疫原性,诱导Th1偏倚的Th1/Th2型体液免疫和细胞免疫应答。但是TFPR1发挥佐剂活性的功能域和能否通过树突状细胞发挥佐剂功能均不清楚,以及不知道它用作复合佐剂的主要组份是否有效,本课题针对这三个问题开展研究。目的研究树突状细胞在TFPR1发挥佐剂功能中的作用以及TFPR1发挥佐剂活性的重要结构域,并探索TFPR1作为主要组分的复合佐剂的可行性和有效性。方法（1）树突状细胞在TFPR1发挥佐剂功能中的作用研究以小鼠骨髓来源的树突状细胞为研究对象,加入TFPR1共孵育24 h,并以LPS（脂多糖）作为阳性对照、PBS作为阴性对照,分别从形态学、肌动蛋白的分布变化以及细胞表面标志三个方面分析树突状细胞的成熟情况,并ELISA检测TFPR1处理的树突状细胞分泌的细胞因子水平变化。（2）TFPR1活性功能区的研究利用生物信息学预测TFPR1的B细胞表位,结合TFPR1的二级结构和关键结构域... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：90 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

树突状细胞的形态在TFPRl刺激下发生变化(100X)

安徽医科大学硕士学位论文再结合树突状细胞特征性的形态变化，从形态学上表明 TFPR1 具有促进树突状细胞成熟的作用。3.3 TFPR1 上调树突状细胞表面标志的表达在从形态学证明 TFPR1 具有促进树突状细胞成熟的作用的基础上，进一步利用流式细胞术检测树突状细胞表面分子在 TFPR1 刺激后的变化，细胞表面 CD40、CD80、CD86 和 MHCⅡ在不同成熟状态的树突状细胞表面表达水平不同[23,28]。树突状细胞在 TFPR1 作用下，其表达水平与阴性对照细胞相比显著上调，虽然上调水平略低于阳性对照 LPS 处理的细胞（图 3）。该结果进一步表明 TFPR1 具有促进树突状细胞成熟的作用。

安徽医科大学硕士学位论文测 TFPR1 的 B 细胞表位，结果显示 TFPR1 上存在 9 个 B 细胞a、15-23aa、31-40aa、48-56aa、71-75aa、84-102aa、115-117a144 aa（图 5）。

【参考文献】：
期刊论文
[1]新型佐剂蛋白TFPR1在毕赤酵母系统中的表达及鉴定[J]. 宁秀哲,寇志华,孙维来,朱青,杨裔,邱洪杰,郭晶晶,郭彦,于虹,周育森.  中华微生物学和免疫学杂志. 2016 (04)
[2]蛇毒蛋白triflin功能区TFPR1在大肠杆菌中的表达及其功能初步研究[J]. 孙维来,杨裔,宁秀哲,郭晶晶,于虹,郭彦,寇志华,周育森.  生物技术通讯. 2015(03)



本文编号：3612320