Nrf2参与钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ的抑制剂KN93引起的神经细胞的毒性作用

发布时间：2022-02-11 12:48

　　目的:癫痫作为一种复杂的神经系统性疾病,是由大脑中神经元的异常放电并产生神经兴奋性引起的,其发病率高、发作类型多,且发病机制较为复杂。目前对其发病机制的研究主要集中在离子通道、神经胶质细胞和神经递质等的异常方面,且具体机制并不清楚。Ca²⁺/钙调蛋白依赖性蛋白激酶II（Calcium/Calmodulin-dependent protein kinase II,CaMKII）属于一种多功能丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,它的全酶由四个亚基组成,分别是α、β、γ和δ,共形成30多种亚型,因此CaMKII的功能广泛,在机体多种疾病的发展过程中发挥不可忽视的作用。KN93是CaMKII特异性的抑制剂,它可渗透细胞,从而抑制CaMKII的磷酸化活性。研究发现,在遗传性癫痫大鼠（Tremor,TRM）和震颤大鼠的海马组织中磷酸化的CaMKII蛋白表达明显减少。但目前为止,CaMKII的抑制剂KN93对神经细胞的作用及其机制尚不明确。转录因子NF-E2相关因子2（Nrf2）是帽和领（cap’n’collar,CNC）家族的转录因子之一,该家族还包括Nrf1,Nrf3、p45、p53、... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

KN93给药12或24h后对细胞生存率的影响

中国医科大学硕士学位论文123.2原代海马神经元的培养及形态学的变化首先提取并培养原代海马神经元，培养至7天左右，观察细胞状态，然后可以用于实验操作。如图2所示，是原代海马神经元的培养过程中细胞形态的变化。我们可以看出，随着培养天数地增加，神经元细胞的神经突触从无到有，网状结构逐渐丰富。第一天第三天第五天第七天10μm图2原代海马神经元的培养过程中第1、3、5、7天细胞的形态。(标尺：10μm)

中国医科大学硕士学位论文143.4KN93给药后对原代海马神经元动作电位及神经兴奋性的影响利用全细胞膜片钳技术，检测原代海马神经元对照组，KN93浓度5μmol给药24h，KN93浓度5μmol给药1h和KN92浓度5μmol给药24h实验组动作电位和峰值的记录，如图4(A)所示，对照组与实验组动作电位变化的代表图。如图4(B)所示,左图统计图中与对照组相比KN93浓度5μmol给药24h的细胞动作电位数量增加（*P<0.01），而KN93浓度5μmol给药1h动作电位数量减少（**P<0.01），阴性对照组不变；右图统计图中，与对照组相比KN93浓度5μmol给药24h的细胞动作电位的峰值不变，而KN93浓度5μmol给药1h动作电位的峰值降低（n=6，*P<0.01）。实验证明KN93浓度5μmol给药24h的细胞兴奋性升高并具有统计学意义（n=6）。图4KN93给药后对原代海马神经元动作电位及神经兴奋性的影响(A)原代海马神经元对照组，KN93浓度5μmol给药24h，KN93浓度5μmol给药1h和KN92浓度5μmol给药24h实验组动作电位代表性图；(B)原代海马神经元对照组，KN93浓度5μmol给药24h，KN93浓度5μmol给药1h和KN92浓度5μmol给药24h实验组动作电位的数量和峰值(**P<0.01)。

【参考文献】：
期刊论文
[1]Association between NFE2L2 Gene Polymorphisms and Noise-induced Hearing Loss in a Chinese Population[J]. WANG Bo Shen,XU Kai,ZHANG Hong,PU Yue Pu,YIN Li Hong,HAN Lei,CHEN Lin,WANG Ning,ZHU Bao Li,ZHANG Juan.  Biomedical and Environmental Sciences. 2019(06)
[2]Nrf2信号通路及其在肝组织中的作用[J]. 何茂群,曹智华,苗得足.  药学进展. 2014(04)

硕士论文
[1]钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ的抑制剂KN93对大鼠海马培养神经元与PC12细胞的毒性作用与机制[D]. 赵东仪.中国医科大学 2019



本文编号：3620308