LC-MS/MS法测定兔血浆中伏立康唑的浓度

发布时间：2022-02-15 20:38

　　目的建立LC-MS/MS法测定兔血浆中伏立康唑的浓度,并应用伏立康唑滴眼液在兔体内的药动学研究。方法色谱柱为CAPCELL CORE ADME C18柱（100 mm×2.1 mm,2.7μm）,流动相为乙腈-体积分数为0.1%的甲酸水溶液（体积比为60:40）,流速为0.2 m L·min-1,采用乙醚-二氯甲烷（体积比为3:2）萃取法处理血浆样品,以多反应监测模式（multiple reaction monitoring,MRM）检测,测定兔单眼单次给药后血浆中的伏立康唑浓度。结果伏立康唑质量浓度在0.5¹00.0μg·L^-1内线性关系良好（r=0.995 4）,定量下限为0.5μg·L^-1,日内和日间精密度均小于8.9%,准确度在（-8.0¹.1）%内,平均提取回收率（96.8±7.0）%,基质效应为（98.1±3.9）%。伏立康唑滴眼液在家兔血浆中的主要药动学参数:t_1/2为（2.9±0.7）h,ρmax为（50.8±12.7）μg·L^-1,tma... 

【文章来源】：沈阳药科大学学报. 2017,34(03)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

伏立康唑(A)和氟康唑(B，IS)［M+H］+的产物离子全扫描质谱图

储备液(Ⅰ)，用甲醇定量稀释制得5mg·L－1的伏立康唑储备液(Ⅱ)。精密取储备液(Ⅱ)适量，分别加甲醇定量稀释制成5、10、100、800μg·L－1的质控溶液，4℃保存备用。2.3血浆样品处理取兔血浆样品100μL，加甲醇和内标溶液各10μL，涡旋混合1min，加乙醚-二氯甲烷(体积比为3∶2)2mL，涡旋震荡5min，13000r·min－1离心5min，取上清液，40℃氮气吹干，残渣加乙腈-水(体积比为60∶40)混合溶剂200μL，涡旋混匀2min，13000r·min－1离心(4℃)5min，取上清液2μL进样分析。2.4分析方法的确证2.4.1专属性取6只兔空白血浆各100μL，除以10μL甲醇代替内标溶液外，按“2.3”条方法操作，得色谱图2A;另将5μg·L－1的伏立康唑标准溶液和内标溶液200μg·L－1加入兔空白血浆中，同法操作，得色谱图2B;取给药后2h兔血浆样品100μL，按“2.3”条方法操作，得色谱图2C。伏立康唑与内标氟康唑的保留时间分别为1.77min及1.15min，两者峰形良好，血浆中内源性物质对测定无干扰，方法专属性良好。A—Blankrabbitplasmasample;B—Blankrabbitplasmaspikedwithstandardsolutionofvoriconazole5μg·L－1andin-ternalstandard200μg·L－1;C—Plasmasampleobtainedat2hafterocularadministrationof10g·L－1voriconazoleeyedropstorabbitFig．2ＲepresentativeMＲMchromatographsoffluconazole(a，IS)andvoriconazole(b)图2内标氟康唑(a)和伏立康唑(b)的MＲM色谱图第3期李兆琴等:LC-MS/MS法测定兔血浆中伏立康唑的浓度241

从?嗖?(MＲM)模式，毛细管电压:3.0kV，离子源温度:150℃，脱溶剂气和锥孔气:氮气，脱溶剂气温度:350℃，脱溶剂气流量:700L·h－1，碰撞气流速:0.13mL·min－1。用于伏立康唑定量及定性分析的离子反应分别为m/z350.0→m/z126.9和m/z350.0→m/z280.5，锥空电压:28V，碰撞电压分别为30eV和14eV，用于内标(internalstandard，IS)氟康唑定量及定性分析的离子反应分别为m/z307.1→m/z219.7和m/z307.1→m/z237.7，锥空电压:20V，碰撞电压分别为16eV和14eV。在此条件下，伏立康唑及内标氟康唑的二级离子碎片图如图1。Fig．1Productionspectraof［M+H］+ofvoriconazole(A)andfluconazole(B，IS)图1伏立康唑(A)和氟康唑(B，IS)［M+H］+的产物离子全扫描质谱图2.2溶液的制备标准溶液:精密称取伏立康唑对照品10mg，置10mL量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，制得1g·L－1的对照品储备液(Ⅰ)。取储备液(Ⅰ)，用甲醇定量稀释制得5mg·L－1的伏立康唑储备液(Ⅱ)。精密取储备液(Ⅱ)适量，分别加甲醇定量稀释制成5、10、25、50、200、500、1000μg·L－1的系列标准溶液，4℃保存备用。内标溶液:精密称取氟康唑对照品10mg，置10mL量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，制得1g·L－1的氟康唑储备液。精密取储备液适量，用甲醇定量稀释制得质量浓度为200μg·L－1的内标溶液，4℃保存备用。质控溶液:精密称取伏立康唑对照品10mg，置10mL量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，制得1g·L－1的对照品储备液(Ⅰ)。取240沈阳药科大学学报第34卷

【参考文献】：
期刊论文
[1]伏立康唑的抗真菌机制与治疗药物监测进展[J]. 张娟,廖银根.  中国药房. 2012(14)
[2]伏立康唑在眼部真菌感染性疾病的应用[J]. 戴助.  中国药师. 2012(03)
[3]高效液相色谱法测定人血浆中伏立康唑浓度[J]. 史卉妍,彭亮,谭志荣,康桢,何鑫,罗丽芳,吴卫华,阳国平,欧阳冬生.  中南药学. 2007(04)
[4]新一代三唑类抗真菌药物伏立康唑[J]. 封宇飞,雷静,傅德兴.  中国新药杂志. 2003(01)
[5]伏立康唑滴眼液局部应用的药物代谢动力学实验研究[J]. 孙明霞,陈家祺,姚美村,叶成添,李佳,黄明明.  中华眼科杂志. 2008 (04)



本文编号：3627230