替普瑞酮对百草枯诱导的SH-SY5Y细胞TDP43蛋白异常聚集抑制作用的研究

发布时间：2022-02-19 09:17

　　目的探讨替普瑞酮（GGA）对百草枯（PQ）诱导的SH-SY5Y氧化应激模型细胞中TAR DNA/RNA结合蛋白43（TDP43）蛋白异常聚集的影响及其相关机制。方法将SH-SY5Y细胞分为无任何处理组（A组）,以100μmol/L的GGA处理SH-SY5Y细胞24 h组（B组）,分别以0、20、50、100μmol/L的GGA处理氧化应激模型细胞24 h组（C～F组）。分别用MTT比色法、流式细胞仪与免疫印迹法（Western blot）检测各组SH-SY5Y细胞的存活率、凋亡率、TDP43蛋白表达水平、P62蛋白表达水平及LC3BⅡ/Ⅰ比值。为观察GGA对TDP43蛋白表达水平影响是否通过自噬发挥作用,将SH-SY5Y细胞分为无任何处理组（A组）,分别以0、50、50μmol/L的GGA处理氧化应激模型细胞24 h组（G～I组）,其中I组用5 mmol/L的3-MA阻断自噬,利用Western blot检测各组SH-SY5Y细胞TDP43蛋白表达水平和LC3BⅡ/Ⅰ比值。结果 A～F组SH-SY5Y细胞的存活率、凋亡率、TDP43蛋白表达水平、P62蛋白表达水平及LC3BⅡ/Ⅰ比值比... 

【文章来源】：精准医学杂志. 2020,35(03)

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 细胞模型的制备及细胞免疫荧光化学染色检测细胞内TDP43
    1.3 MTT比色法检测SH-SY5Y细胞存活率
    1.4 流式细胞仪检测SH-SY5Y细胞凋亡情况
    1.5 免疫印迹法(Western blot)检测细胞中P62、TDP43蛋白表达水平及LC3BⅡ/Ⅰ比值
    1.6 Western blot检测3-MA阻断自噬后细胞中TDP43蛋白表达水平
    1.7 统计学分析
2 结 果
    2.1 细胞免疫荧光化学染色检测细胞模型内TDP43表达情况
    2.2 各组SH-SY5Y细胞存活率和凋亡率比较
    2.3 各组SH-SY5Y细胞中TDP43、P62蛋白表达水平及LC3BⅡ/Ⅰ比值比较
    2.4 3-MA阻断自噬后各组细胞中TDP43 蛋白与LC3BⅡ/Ⅰ比值情况
3 讨 论



本文编号：3632637