GFP标记脐带间充质干细胞治疗mdx小鼠的药代动力学研究

发布时间：2022-02-24 00:50

　　目的应用小鼠脐带间充质干细胞（mUCMSC）示踪方法和mdx小鼠研究细胞药物的药代动力学。方法 GFP转染标记m UCMSC,局部注射0. 4 m L（5×106个GFP-mUCMSC）细胞悬液到腓肠肌和膈肌损伤的mdx小鼠腹腔,在1 h、3 h、5 h、24 h、1周等5个时间点用活体成像系统观察小鼠体内的荧光信号,观察结束后处死小鼠,采集膈肌制作冰冻切片并在荧光显微镜下观察荧光信号。结果 m UCMSC与MOI为150的病毒载体共培养72 h可以成功标记GFP。局部腹腔注射0. 4 mL（5×10⁶个GFP-mUCMSC）后1 h,用活体成像系统观察到mdx小鼠腹壁下注射细胞的部位有明亮的绿色荧光集中分布,随着时间延长,荧光面积逐渐减小,24 h后荧光强度明显变弱,荧光面积大幅缩小,一周后荧光信号几乎消失;此时,在荧光显微镜下仍可观察到mdx小鼠膈肌内存在荧光信号,与未注射细胞的对照组有显著差异（P﹤0. 05）。结论注射到腹腔的脐带间充质干细胞可以进入损伤的膈肌,其GFP荧光信号1周内逐渐消失,活体成像系统是监测干细胞体内动态分布和清除率的有效工具。 

【文章来源】：中国比较医学杂志. 2020,30(02)北大核心

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 实验动物
    1.2 主要试剂与仪器
    1.3 实验方法
        1.3.1 m UCMSC的GFP转染标记
        1.3.2 腹腔注射及活体成像观察
        1.3.3 膈肌组织学镜检观察
    1.4 统计学方法
2 结果
    2.1 GFP转染标记的m UCMSC
    2.2 体内m UCMSC的分布和降解
    2.3 镜检观察膈肌内m UCMSC的分布
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]细胞的命运:间充质干细胞的药代动力学[J]. 韩立,惠利健,潘国宇.  中国细胞生物学学报. 2018(06)
[2]绿色荧光蛋白标记的Lewis肺癌小鼠原位模型的建立及鉴定[J]. 王锋,田小丽,马诗静,龚龑,谢丛华.  武汉大学学报(医学版). 2018(05)
[3]应用小动物活体成像追踪观察EGFP标记的间充质干细胞[J]. 王伟,陈超,刘延明,张男,吕丽燕,宋现让,韩发彬.  中国细胞生物学学报. 2016(02)
[4]小鼠脐带间充质干细胞的体外诱导分化[J]. 朱慧,叶莉,何洁,余璞,王金祥,王强,赵晶,庞荣清,白杰英.  中国实验动物学报. 2015(06)



本文编号：3641633