转运表阿霉素的肝靶向肿瘤微环境响应的多级纳米粒的制备与评价

发布时间：2022-08-07 17:17

　　肿瘤靶向的纳米载体药物是治疗实体瘤的手段之一,可以提高药物在肿瘤组织和肿瘤细胞的分布。然而实体瘤由于坚实的细胞外基质（extracellular matrix,ECM）以及较高的肿瘤内流体压力（interstitial fluid pressure,IFP）,限制了药物向实体瘤内部的渗透。为解决向实体瘤内部持续输送纳米药物的问题,本研究制备了一种肿瘤微环境响应的多级纳米载体,用以靶向递送抗肿瘤药物表柔比星,其特征为:通过自由基加成断裂链转移（RAFT）聚合反应合成两亲性三嵌段聚合物:聚乙二醇-聚（2-二异氨基甲基丙烯酸乙酯）-聚（2-胍乙基甲基丙烯酸酯）（PEDG,mPEG-PDPA-PG）,其与表柔比星（Epirubicin,EPI）形成载药胶束（NPs-EPI）;再以促渗透肽iRGD修饰的明胶（G-iRGD）作为载体,通过静电作用与载药胶束和透明质酸酶（Hyaluronidase,HAase）形成多级纳米粒（MGNPs）。合成的聚合物通过核磁共振、凝胶渗透色谱进行结构鉴定;利用透射电镜观察其形态;马尔文激光粒度仪观察其粒径及电位;采用酶标仪测定NPs-EPI的载药量及包封率;采用透... 

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
前言
第一部分 载体材料的制备与表征
    材料与方法
        1 实验材料
        2 实验仪器
        3 N-叔丁氧羰基-甲基丙烯酸氨基乙酯(tBAM)的合成
        4 两亲性三嵌段聚合物聚乙二醇-聚(2-(二异丙基氨基)乙基甲基丙烯酸酯)-聚(2-胍乙基甲基丙烯酸酯)(PEDG,mPEG-PDPA-PG)的合成
    结果
        1 tBAM的结构确定
        2 mPEG-PDPA-tBAM的结构确定
    讨论
第二部分 多级纳米粒的制备及理化性质的研究
    材料与方法
        1 实验材料
        2 实验仪器
        3 多级纳米粒(MGNPs)的制备
            3.1 盐酸表阿霉素脱盐酸盐
            3.2 空白胶束(NPs)及载药胶束(NPs-EPI)的制备
            3.3 gelatin-iRGD(G-iRGD)的合成
            3.4 多级纳米粒的制备
        4 空白胶束(NPs)与载药胶束(NPs-EPI)的理化性质的研究
            4.1 形态检测
            4.2 粒径和Zeta检测
            4.3 空白胶束(NPs)酸敏感性实验
            4.4 载药胶束表阿霉素的载药量以及包封率的测定
            4.5 体外释放实验
        5 基质金属蛋白酶(MMP-2)降解MGNPs的考察
        6 体外HAase降解HA能力的考察
    结果
        1 多级纳米粒的制备
            1.1 Gelatin-iRGD的合成检测
            1.2 多级纳米粒的制备
        2 空白胶束(NPs)与载药胶束(NPs-EPI)的理化性质的研究
            2.1 形态检测
            2.2 粒径、电位检测
            2.3 空白胶束(NPs)酸敏感性实验
            2.4 表阿霉素的载药量以及包封率的测定
            2.5 体外释放实验
        3 MMP-2降解MGNPs的考察
        4 体外HAase降解HA能力的考查
    讨论
第三部分 多级纳米粒(MGNPs)体外活性研究
    材料与方法
        1 实验材料
        2 实验仪器
        3 HepG2细胞的培养
            3.1 细胞实验操作条件
            3.2 细胞培养
            3.3 细胞传代
            3.4 细胞冻存
            3.5 细胞复苏
        4 细胞毒性实验
        5 载药胶束的体外抗肿瘤效果
        6 肿瘤球渗透性实验
            6.1 建立体外3D肝癌肿瘤球模型
            6.2 载药胶束的穿透肿瘤球的能力
        7 溶酶体逃逸实验
        8 体外细胞摄取实验
            8.1 细胞铺板
            8.2 细胞摄取率实验
    结果
        1 细胞毒性实验
        2 体外抗肿瘤实验
        3 渗透性实验
        4 溶酶体逃逸实验
        5 细胞摄取实验
    讨论
第四部分 多级纳米粒(MGNPs)体内活性研究
    材料与方法
        1 实验材料
        2 实验仪器
        3 裸鼠皮下异位肝癌模型的建立
        4 体内分布实验
        5 体内肿瘤渗透性实验
    结果
        1 体内分布实验
        2 体内肿瘤渗透性实验
    讨论
全文结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
缩略词表
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]PLGA-PEG共聚物负载多西紫杉醇的药物输运体系的计算机模拟[J]. 刘红艳,郭泓雨,周健.  化学学报. 2012(23)



本文编号：3670725