红芪多糖和黄酮类成分对rBMSCs和ROBs成骨分化的影响

发布时间：2022-08-23 18:49

　　随着人口日趋老龄化,骨质疏松症的发病率逐年上升,对人类健康构成很大威胁。迄今,利用中医药治疗骨质疏松症已受到越来越多研究者的关注。本文将中药红芪的主要成分红芪多糖和黄酮类成分作用于体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞（rBMSCs）和大鼠颅骨成骨细胞（ROBs）,筛选促进两种细胞成骨活性最佳的成分并探究其发挥促成骨作用的机制。本论文开展的具体研究内容如下:第一部分检测经3种不同浓度红芪多糖（HPS-1、HPS-2、HPS-3）处理后rBMSCs和ROBs细胞活性和成骨相关因子的变化,发现20和50μg/mL HPS-1能显著促进rBMSCs和ROBs的增殖,提高碱性磷酸酶（ALP）活性,增加钙化结节面积和数量（P<0.05或P<0.01）,而HPS-2和HPS-3对两种细胞成骨分化无显著促进作用。表明3种红芪多糖中只有HPS-1显著促进rBMSCs和ROBs分化、矿化。第二部分检测经红芪中5种不同浓度黄酮类化合物（毛蕊异黄酮、芒柄花素、芒柄花苷、异甘草素和美迪紫檀素）处理后rBMSCs和ROBs细胞活性和成骨相关因子的变化,发现5种黄酮化合物均能促进rBMSCs和ROBs的增殖,... 

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
中英文对照及英文缩写词表
第一章 文献综述
    1.1 红芪的研究概况
        1.1.1 红芪的药用历史和产地
        1.1.2 红芪的主要活性成分
        1.1.3 红芪的药理作用
    1.2 骨质疏松
        1.2.1 骨重建及其调节网络
        1.2.2 骨质疏松的定义
        1.2.3 骨质疏松的发病机制
        1.2.4 骨质疏松的药物治疗
    1.3 立题依据
第二章 红芪多糖对rBMSCs和 ROBs成骨分化的影响
    2.1 引言
    2.2 实验部分
        2.2.1 实验材料
        2.2.2 实验方法
    2.3 实验结果
        2.3.1 三种红芪多糖对rBMSCs的作用
        2.3.2 三种红芪多糖对ROBs的作用
    2.4 讨论
第三章 红芪黄酮类成分对r BMSCs和 ROBs成骨分化的影响
    3.1 引言
    3.2 实验部分
        3.2.1 实验材料
        3.2.2 实验方法
    3.3 实验结果
        3.3.1 5种黄酮类化合物对rBMSCs的作用
        3.3.2 5种黄酮类化合物对ROBs的作用
    3.4 讨论
第四章 HPLC法测定细胞内外液及膜上毛蕊异黄酮的含量
    4.1 引言
    4.2 实验部分
        4.2.1 实验材料
        4.2.2 实验方法
    4.3 实验结果
        4.3.1 洗脱次数的考察
        4.3.2 专属性考察
        4.3.3 线性关系考察
        4.3.4 精密度
        4.3.5 重复性试验
        4.3.6 加样回收率试验[12]
        4.3.7 稳定性试验
        4.3.8 细胞外液、解离液及裂解液中毛蕊异黄酮的含量测定
    4.4 讨论
第五章 毛蕊异黄酮通过激活IGF-1R/PI3K/Akt信号通路促进ROBs成骨分化
    5.1 引言
    5.2 实验部分
        5.2.1 实验材料
        5.2.2 实验方法
    5.3 实验结果
        5.3.1 毛蕊异黄酮对ROBs蛋白基因的影响
        5.3.2 LY抑制由毛蕊异黄酮诱导增加的p-Akt水平。
        5.3.3 GSK抑制由毛蕊异黄酮诱导增加的pIGF-1R和 p-Akt水平。
        5.3.4 GSK和LY对毛蕊异黄酮提高成骨性蛋白表达的影响
        5.3.5 GSK和LY对毛蕊异黄酮提高成骨性基因表达的影响
        5.3.6 GSK和 LY对毛蕊异黄酮提高ALP活性的影响
        5.3.7 GSK和LY对毛蕊异黄酮提高钙化结节面积和数量的影响
    5.4 讨论
第六章 总结与展望
    6.1 主要结论
        6.1.1 红芪多糖对rBMSCs和 ROBs成骨分化的影响
        6.1.2 红芪黄酮类成分对rBMSCs和 ROBs成骨分化的影响
        6.1.3 HPLC法测定细胞内外液及膜上毛蕊异黄酮的浓度
        6.1.4 毛蕊异黄酮通过激活IGF-1R/PI3K/Akt信号通路促进ROBs成骨分化
    6.2 工作展望
参考文献
在校期间研究成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]红芪和黄芪的比较研究[J]. 李越峰,张育贵,牛江涛,辛二旦,张淑娟,严兴科.  时珍国医国药. 2019(10)
[2]红芪多糖与黄芪多糖对大鼠抗衰老作用的比较研究[J]. 史生辉,董得喜,李生有,吴雪花,张军文.  中国现代应用药学. 2019(16)
[3]Spectrum-effect relationship between HPLC fingerprints and bioactive components of Radix Hedysari on increasing the peak bone mass of rat[J]. Xin-Yue Chen,San-Hu Gou,Zhi-Qiang Shi,Zhi-Yuan Xue,Shi-Lan Feng.  Journal of Pharmaceutical Analysis. 2019(04)
[4]中医药防治老年骨质疏松骨折研究进展[J]. 尚先宝.  医学信息. 2019(11)
[5]补肾中药在防治骨质疏松症中的应用[J]. 陈张琪,黄静雯,周冠宇,徐周末,张豪.  医学理论与实践. 2019(09)
[6]红芪杂多糖及其透明质酸水凝胶对大鼠骨关节炎的治疗作用[J]. 张,周尚儒,燕玉奎,郭玫,王志旺.  免疫学杂志. 2019(01)
[7]基于傅里叶变换红外光谱指纹特征的甘肃8个主产县红芪药材鉴别研究[J]. 顾志荣,许爱霞,祁梅,李芳,张瑛,钱倩,石磊.  中国中医药信息杂志. 2018(11)
[8]红芪多糖对糖尿病心肌病db/db小鼠核因子2相关因子2信号通路的影响[J]. 何流,金智生,张花治,王栋,王东旭,和彩铃.  中国临床药理学杂志. 2018(15)
[9]中医辨治骨质疏松症研究进展[J]. 郑斌,阮国辉,嵇辉.  江苏中医药. 2018(07)
[10]中药治疗骨质疏松症研究进展[J]. 孙亚奇,卞艳芳,周春娜,马乐韵,王素娴,蔡溱.  中国临床医学. 2018(02)

硕士论文
[1]低频脉冲电磁场通过初级纤毛调控的ERα/IGF-1R信号通路促进骨形成的机制研究[D]. 朱保应.兰州理工大学 2018
[2]基于细胞生物固相法探讨玉屏风散抗肿瘤的物质基础[D]. 丁慧.南京中医药大学 2018
[3]应用成骨细胞生物色谱法研究牡丹皮促进骨折愈合的效应物质[D]. 顾伟伟.南京中医药大学 2017



本文编号：3678294