低分子红藻硫酸多糖制备及其对小鼠细菌性与过敏性腹泻的抑制作用

发布时间：2022-09-28 20:38

　　近年来,由于抗生素滥用、环境污染以及工作压力等因素,肠道菌群紊乱人群越来越多,进而导致细菌性与过敏性腹泻易感人群快速增加。本文从红藻中提取和制备低分子量硫酸半乳聚糖,对其抗菌活性的构效关系及作用机理进行了研究,并在动物水平上进一步探讨肠道菌群调节与抑制细菌性、过敏性腹泻的关系。主要研究结果如下:1.低分子量硫酸多糖的制备及构效关系研究。通过水提醇沉法从麒麟菜（Eucheuma serra）和龙须菜（Gracilaria lemameiformis）中提取硫酸半乳聚糖,并采用EDTA离子螯合-超滤技术脱除金属离子;麒麟菜硫酸半乳聚糖（ESP）和龙须菜硫酸半乳聚糖（GSP）中的半乳糖含量分别为93.4%和93.5%,硫酸根含量分别为30.0%和15.4%,总灰分分别为8.2%和6.7%;121℃下降解1 h,ESP和GSP的粘度分别降到0.02 dL/g和0.05 dL/g。傅里叶红外光谱分析表明,降解后的多糖在1265 cm^-1、933 cm^-1具有硫酸基团、3,6-内醚半乳糖的特征吸收峰。以产毒大肠杆菌（Enterotoxigenic Esc... 

【文章页数】：95 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第1章 引言
    1.1 多糖的提取、纯化及鉴定
        1.1.1 海藻硫酸多糖的提取
        1.1.2 海藻多糖的纯化
        1.1.3 多糖的组成及构效关系
        1.1.4 多糖的降解和分级
    1.2 多糖抑菌机理及调节菌群作用
        1.2.1 多糖抑菌活性研究
        1.2.2 多糖抑菌机理研究
        1.2.3 多糖调节肠道菌群
    1.3 细菌性腹泻的研究
        1.3.1 腹泻的危害
        1.3.2 细菌性腹泻的机制
        1.3.3 细菌性腹泻的治疗
    1.4 多糖对食物过敏的防治作用
        1.4.1 食物过敏反应
        1.4.2 食物过敏与肠道菌群的关系
        1.4.3 食物过敏的防治
    1.5 论文立题依据、目的及主要内容
        1.5.1 论文立体依据和目的
        1.5.2 研究内容
第2章 硫酸多糖的提取
    2.1 实验材料与仪器
        2.1.1 实验材料
        2.1.2 主要实验试剂
        2.1.3 主要仪器设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 粗多糖提取
        2.2.2 多糖金属离子的脱除
        2.2.3 多糖降解
        2.2.4 多糖理化性质鉴定
        2.2.5 多糖特征峰扫描
        2.2.6 多糖的单糖组成分析
        2.2.7 多糖粘度计算
        2.2.8 扫描电镜
    2.3 结果与分析
        2.3.1 粗多糖成分分析
        2.3.2 金属离子的脱除
        2.3.3 高压降解对多糖的影响
        2.3.4 降解后多糖的电镜观察
    2.4 本章小结
第3章 不同理化性质多糖的制备及抑菌活性鉴定
    3.1 实验材料与仪器
        3.1.1 实验材料
        3.1.2 供试菌种
        3.1.3 主要实验试剂
        3.1.4 主要仪器
    3.2 实验方法
        3.2.1 不同分子量硫酸多糖的制备
        3.2.2 不同阴离子强度硫酸多糖的制备
        3.2.3 抑菌实验
        3.2.4 最低抑菌浓度和最低杀菌浓度的确定
        3.2.5 碳源利用度实验
    3.3 结果与分析
        3.3.1 降解与脱金属对抑菌活性的影响
        3.3.2 分子量对硫酸多糖的影响
        3.3.3 阴离子强度对硫酸多糖的影响
        3.3.4 单糖组成对抑菌活性的影响
        3.3.5 碳源转化能力试验
    3.4 本章小结
第4章 硫酸多糖对大肠杆菌抑菌机理
    4.1 实验材料与仪器
        4.1.1 实验材料
        4.1.2 供试菌株及培养基
        4.1.3 主要实验试剂
        4.1.4 主要仪器设备
    4.2 实验方法
        4.2.1 硫酸多糖对肠道微生物生长的作用
        4.2.2 硫酸多糖作用位点研究
        4.2.3 细胞膜完整性测定
        4.2.4 对细胞膜蛋白的影响
        4.2.5 多糖对细胞膜通透性的影响
        4.2.6 扫描电镜观察细菌表面
        4.2.7 细菌在宿主细胞表面的定植能力
    4.3 结果与分析
        4.3.1 菌种对抑菌活性的影响
        4.3.2 多糖作用位点研究
        4.3.3 多糖对细胞膜完整性的影响
        4.3.4 胞内核酸蛋白质分子泄露
        4.3.5 细胞膜蛋白变化及微观结构损伤
        4.3.6 硫酸多糖对粘附性的影响
    4.4 本章小结
第5章 低分子硫酸多糖对小鼠细菌性腹泻的影响
    5.1 材料与方法
        5.1.1 实验动物
        5.1.2 菌种活化与计数
        5.1.3 实验材料
    5.2 实验方法
        5.2.1 动物模型
        5.2.2 腹泻指数
        5.2.3 小鼠肠HE染色切片和扫描电镜
        5.2.4 小鼠血清因子测定
        5.2.5 菌群
    5.3 结果与分析
        5.3.1 腹泻指数及体重
        5.3.2 小鼠临床症状及解剖观察
        5.3.3 体温及体重变化
        5.3.4 血清变化
        5.3.5 小肠绒毛SEM及 HE染色
        5.3.6 多糖对腹泻小鼠微生物的影响
    5.4 本章小结
第6章 低分子硫酸多糖对小鼠过敏性腹泻的影响
    6.1 实验原料及试剂
        6.1.1 实验动物
        6.1.2 试剂
        6.1.3 实验材料
    6.2 实验方法
        6.2.1 动物模型
        6.2.2 小鼠肠组织HE染色和扫描电镜
        6.2.3 小鼠血清因子测定
        6.2.4 菌群
    6.3 结果与分析
        6.3.1 小鼠体温、腹泻指数、过敏评分
        6.3.2 小鼠临床症状及解剖观察
        6.3.3 小鼠血清因子
        6.3.4 小肠绒毛SEM及 HE染色
        6.3.5 多糖对过敏小鼠肠道微生物的影响
    6.4 本章小结
第7章 结论与展望
    7.1 主要结论
        7.1.1 多糖的提取纯化
        7.1.2 多糖的构效关系及抑菌机理
        7.1.3 多糖对细菌性腹泻的影响
        7.1.4 多糖对食物过敏的影响
    7.2 创新点
    7.3 展望
致谢
参考文献
在学期间科研成果情况


【参考文献】：
期刊论文
[1]辐照技术消减食物过敏原致敏性研究进展[J]. 罗春萍,冯娟,项缨,谢庭辉.  核农学报. 2020(06)
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[4]不同纯化程度豌豆水溶性多糖的电镜扫描分析[J]. 张淑杰,权威,姜宏伟,康玉凡.  农业生物技术学报. 2019(10)
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博士论文
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[3]大粒车前子多糖体内外消化与酵解特征体系构建及其促进肠道健康的作用[D]. 胡婕伦.南昌大学 2014
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硕士论文
[1]植物提取物抑菌活性及抑菌机理[D]. 周云冬.江南大学 2019
[2]坛紫菜硫酸多糖和龙须菜硫酸多糖的抗腹泻活性研究[D]. 刘波.集美大学 2019
[3]红毛藻多糖组成分析、体外免疫诱导活性及抑菌活性研究[D]. 蔡薇.集美大学 2018
[4]坛紫菜多糖的降解及其产物结构的初步表征和抗氧化活性研究[D]. 赵继香.西北大学 2017
[5]海带多糖综合提取纯化工艺的研究[D]. 杨晓雪.山东农业大学 2017
[6]白术多糖对大肠杆菌腹泻模型小鼠肠道黏膜修复机理研究[D]. 尚秋辰.扬州大学 2017
[7]红江蓠多糖的分离纯化及生物活性研究[D]. 狄彤.南京农业大学 2017
[8]耳突麒麟菜寡糖的抗食物过敏研究[D]. 徐莎莎.集美大学 2017
[9]鹿角菜中岩藻多糖提取、分离纯化及其免疫活性研究[D]. 宋海燕.上海海洋大学 2016
[10]海洋硫酸多糖抗菌活性研究及在肉类保鲜中的应用[D]. 陈海秀.集美大学 2016



本文编号：3682345