人血白蛋白中杂蛋白的生物质谱分析

发布时间：2023-02-08 09:01

　　目的建立基于电喷雾质谱(ESI-Q-TOF MS)技术检测人血白蛋白中杂蛋白的方法,考察国内上市的27家企业的28批白蛋白产品中的未知蛋白组分。方法按2015年版《中国药典》四部通则3121方法,采用凝胶过滤色谱柱(Hiprep16/60Sepharyl S-200HR),对人血白蛋白中的各组分进行分离,并收集其中的二聚体、多聚体组分;经除盐、浓缩和胰蛋白酶酶解后,采用BEH C18(2. 1 mm×100 mm,130?)色谱柱,以水(含0. 1%甲酸)-乙腈流动相梯度洗脱,采用色谱-质谱(MS)技术对多肽进行二级质谱序列测定,并利用搜库软件(PLGS3. 0)分析鉴定人血白蛋白中的杂蛋白。结果利用所建立的方法对27家企业的制品进行测定,共检测出23种杂蛋白,其中载脂蛋白A-Ⅱ(apolipoprotein A-Ⅱ)、人结合珠蛋白(haptoglobin)、人血色素结合蛋白(hempoexin)、α-1B-糖蛋白(alpha-1B-glycoprotein)与α-2-HS-糖蛋白(alpha-2HS-glycoprotein)等5种蛋白为所有企业产品共有的杂蛋白;α白蛋白(VE结合蛋...

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【文章目录】：
1 仪器与试剂
2 方法与结果
    2.1 凝胶色谱层析分离
    2.2 杂蛋白的收集与浓缩
    2.3 胰蛋白酶酶解
    2.4 UPLC-ESI-Q-TOF分析
        2.4.1 条件
        2.4.2 ESI-Q-TOF质谱条件
    2.5 数据分析
    2.6 方法的重复性
    2.7 杂蛋白质谱鉴定结果
3 讨论及结论



本文编号：3737715