miR-21在抗结核药物性肝损伤细胞中的机制研究

发布时间：2023-03-09 20:26

　　目的探讨miR-21在抗结核药物性肝细胞损伤中的作用机制。方法培养人正常肝细胞(HL-7702),以最佳三药联合浓度构建肝损伤细胞模型,将细胞分为6组:control组、药物组、药物+miR-21 inhibitor组、inhibitor阴性对照组、药物+miR-21 mimics组、mimics阴性对照组。苏木精-伊红染色法(HE染色)观察各组细胞形态学变化;赖氏法检测各组丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平变化;实时荧光定量PCR (RT-PCR)法检测miR-21及核转录因子κB (NF-κB)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA表达变化;Western blot法检测各组NF-κB蛋白表达水平;酶联免疫吸附法(ELISA)法检测各组炎症因子TNF-α、IL-6表达水平。结果与control组相比,药物组细胞miR-21表达升高,NF-κB、TNF-α、IL-6的mRNA及蛋白水平均升高;过表达miR-21可上调炎症调节因子NF-κB的mRNA及蛋白表达,同时炎症因子TNF-α、IL-6的mRNA及蛋白水平也进一步上升;而...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 细胞培养及分组
    1.3 siRNA转染
    1.4 细胞形态学观察及肝功指标检测
    1.5 肝细胞miR-21、NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA表达检测
    1.6 肝细胞NF-κB、TNF-α、IL-6的蛋白含量检测
    1.7 统计学处理
2 结果
    2.1 各组细胞形态学变化
    2.2 各组细胞上清液中ALT和AST的含量比较
    2.3 各组细胞miR-21和NF-κB、 TNF-α、IL-6的mRNA相对表达量比较
    2.4 各组NF-κB、TNF-α、IL-6蛋白表达比较
3 讨论



本文编号：3758240