新型PRMT5小分子抑制剂的发现及11-MTT对肺癌细胞的作用机制研究

发布时间：2023-03-12 01:50

　　恶性肿瘤目前已经成为威胁人类健康与生命的最严重的疾病之一,其发病率与死亡率仍处于上升趋势,合理且有效的药物应用是治疗恶性肿瘤的有效手段,这就使得抗肿瘤药物研发成为了工业界和学术界药物研发的热点。研究发现表观遗传学中的表观遗传修饰及调控细胞死亡的细胞自噬在肿瘤发生发展过程中发挥着至关重要的作用。表观遗传学是指在不改变DNA序列的情况下,研究可遗传基因表达或细胞表型变化,这种变化能够随着个体发育和细胞增殖稳定遗传下去。表观遗传修饰相关的基因的异常表达往往伴随着疾病的发生:如癌症、糖尿病以及阿尔茨海默症等。细胞自噬是控制细胞命运走向的关键机制,在肿瘤发展过程中表现出两面性:在肿瘤发生的早期,自噬能够清除胞内的不利因素以抑制肿瘤的发展;但是肿瘤一旦形成自噬就成为肿瘤细胞抵制不利环境的有力武器。除癌症外,自噬功能的紊乱与人类心力衰竭、神经退行性疾病以及炎症等其他疾病也密切相关。蛋白精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)是表观遗传修饰相关的酶,它能够催化组蛋白或者非组蛋白的甲基化修饰过程,其在多种人类恶性肿瘤中的均过表达,是潜在的抗肿瘤靶标,目前已经有两种PRMT5的抑制剂处于临床I期研究阶段。本文第一...

【文章页数】：90 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
术语与符号说明
摘要
abstract
第一章 蛋白精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)新型小分子抑制剂的发现研究
    1.1 前言
        1.1.1 表观遗传学概念及内容
        1.1.2 组蛋白修饰概念及内容
        1.1.3 蛋白质精氨酸的甲基化过程
        1.1.4 蛋白精氨酸的甲基转移酶的底物及生物学功能
        1.1.5 蛋白精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)的概述
        1.1.6 蛋白精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)与肿瘤发生发展的关系
        1.1.7 蛋白精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)抑制剂的研究进展
        1.1.8 总结
    1.2 实验材料、试剂与主要仪器设备
        1.2.1 细胞株
        1.2.2 试剂及耗材
        1.2.3 主要仪器设备
        1.2.4 主要溶液及试剂配方
    1.3 5-甲基苯并恶唑类PRMT5 小分子抑制剂的发现研究
        1.3.1 实验方法
        1.3.2 实验结果与讨论
        1.3.3 总结
    1.4 5-苄基-2-苯基硫氮酮类PRMT5 小分子抑制剂的发现研究
        1.4.1 实验方法
        1.4.2 实验结果与讨论
        1.4.3 总结
第二章 吲哚生物碱11-MT诱导人肺癌细胞程序性死亡的机制研究
    2.1 前言
        2.1.1 天然产物抗肿瘤研究概述
        2.1.2 细胞程序性死亡方式
    2.2 实验材料与试剂
        2.2.1 细胞株与生物碱小分子来源
        2.2.2 材料与试剂
        2.2.3 抗体
        2.2.4 仪器设备
        2.2.5 试剂及配方
    2.3 实验方法
        2.3.1 细胞复苏
        2.3.2 细胞形态学观察
        2.3.3 细胞生长抑制率的测定
        2.3.4 细胞凋亡检测
        2.3.5 细胞总蛋白提取
        2.3.6 蛋白浓度测定
        2.3.7 免疫印迹(Western Blot)实验
        2.3.8 免疫沉淀(IP)实验
        2.3.9 乳酸脱氢酶(LDH)含量检测
        2.3.10 吖啶橙法检测自噬现象
    2.4 实验结果
        2.4.1 11-MT抑制人NSCLC细胞增殖
        2.4.2 11-MT诱导人NSCLC细胞发生非凋亡性死亡
        2.4.3 11-MT诱导人NSCLC细胞发生程序性坏死(necroptosis)
        2.4.4 11-MT诱导人NSCLC细胞发生自噬
        2.4.5 11-MT通过诱导自噬来抑制人NSCLC细胞的程序性坏死
        2.4.6 11-MT通过AMPK-mTOR信号通路调节自噬
        2.4.7 JNK参与调控11-MT诱导的自噬过程
    2.5 讨论
第三章 总结
参考文献
致谢
附录



本文编号：3760692