发酵类脂溶性药物中残留DNA检测关键影响因素——溶剂的筛选与确定

发布时间：2023-05-13 19:00

　　目的:考察不同溶剂对发酵类脂溶性药物中残留DNA测定准确性的影响并确定最佳溶剂。方法:以脂溶性药物-环孢素为例,通过研究DNA检测全过程中各步骤溶解因素对检测结果的影响,从供试品溶液制备、供试品溶液与DNA试剂盒试剂相溶性及DNA溶液稳定性3个方面入手,对不同种类的溶剂进行考察和筛选,并根据荧光染色法的原理,采用Qubit?DNA检测试剂盒对环孢素供试品溶液中残留DNA进行测定,探讨溶剂选择的适用性和合理性。此外,应用筛选的溶剂对另一种脂溶性药物——两性霉素B中残留DNA进行了测定,进一步验证可靠性。结果:0.1 mol·L^-1盐酸-N,N-二甲基甲酰胺(1∶4)、0.1 mol·L^-1醋酸-N,N-二甲基甲酰胺(1∶4)和0.1 mol·L^-1柠檬酸-N,N-二甲基甲酰胺(1∶4)3种混合溶剂对脂溶性药物均有较好溶解性并能与DNA试剂较好相溶;进一步的DNA稳定性研究结果显示,0.1 mol·L^-1柠檬酸-N,N-二甲基甲酰胺(1∶4)对DNA结构与性质不产生影响,稳定性最好。结论:采用0.1 m...

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【文章目录】：
1 仪器与试药
2 方法与结果
    2.1 溶液的配制
        2.1.1 0.1 mol·L-1柠檬酸-DMF(1∶4）溶剂
        2.1.2 DNA系列标准品溶液
        2.1.3 供试品溶液
        2.1.4加标供试溶液
        2.1.5 Qubit工作液
    2.2 DNA测定法
        2.2.1 仪器标准曲线校正
        2.2.2溶液测定
    2.3 专属性
    2.4 线性与范围
    2.5 精密度
    2.6 检测下限（LOD)
    2.7 准确度
    2.8 样品测定
3 讨论
    3.1 溶剂考察一般步骤及关键点
    3.2 溶剂的筛选
    3.3 溶剂对DNA稳定性的影响
    3.4 方法的验证与应用
4 小结



本文编号：3816321