右美托咪定通过miR-142-3p/昼夜节律基因通路调节神经元增殖及凋亡研究

发布时间：2023-10-13 20:47

　　目的本研究旨在探讨右美托咪定通过miR-142-3p作用于昼夜节律基因(ARNTL)调节神经元增殖及凋亡的影响。方法将一半大鼠海马元代神经元细胞分为对照组(未进行任何处理)和实验组(50μmol·L^-1右美托咪定),对照组予以等体积的培养基液。其次,再将另一半细胞大鼠海马元代神经元细胞分为空白组(未进行任何处理)、过表达组(转染miR-142-3p模拟物)、抑制表达组(转染miR-142-3p抑制剂;通过实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印记法检测miR-142-3p及ARNTL表达;通过四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测细胞增殖;通过流式细胞术检测细胞凋亡。通过双荧光素酶报告基因实验验证ARNTL与miR-142-3p的靶向关系。结果给药48 h后,实验组和对照组的海马神经元细胞增殖率分别为(1.65±0.08)%和(1.03±0.06)%;细胞凋亡率分别为(3.94±0.15)%和(9.65±0.13)%;miR-142-3p相对表达量分别为1.66±0.14和1.05±0.12;ARNTL基因相对表达量分别为0.85±0.06和0.96±0.19,差...

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【文章目录】：
材料与方法
    1 材料
    2 实验方法
        2.1 细胞培养、分组及给药方法
        2.2 以四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测海马神经元细胞增殖能力
        2.3 以流式细胞术检测海马神经元细胞凋亡率
        2.4 以逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR) 法检测海马神经元细胞miR-142-3p及ARNTL基因表达
        2.5 用蛋白质印迹(Western Blotting)法检测海马神经元细胞ARNTL蛋白表达
        2.6 用双荧光素酶报告基因实验验证ARNTL与miR-142-3p的靶向关系
    3 统计学处理
结 果
    1 右美托咪定对海马神经元细胞活性及凋亡影响
    2 右美托咪定对海马神经元细胞miR-142-3p及ARNTL表达影响
    3 转染miRNA对海马神经元细胞miR-142-3p、ARNTL、细胞增殖及凋亡表达影响
    4 ARNTL与miR-142-3p的靶向关系
讨 论



本文编号：3853746