靶向降解PLK1/BRD4蛋白的嵌合体合成和生物活性研究

发布时间：2023-12-20 08:04

　　癌症已经成为我国最主要的公共卫生问题,威胁人们的生命健康,同时也极大加重社会的负担,寻找更好的治疗癌症的方法始终是科研人员的重点话题。靶向药物是目前临床效果相对较好、患者接受度相对较高的一种癌症治疗方法。随着研究人员对肿瘤微环境和肿瘤异质性的深入了解,肿瘤的靶向治疗技术逐渐从靶向组织器官水平,将药物富集在肿瘤部位转向靶向肿瘤细胞中的相关致病蛋白和影响肿瘤微环境的蛋白,从基因和蛋白水平开发新的肿瘤治疗药物和方法。根据泛素调控蛋白质降解过程这一机制,形成一种新兴的新药开发技术:蛋白降解靶向嵌合体(Proteolysis-targeting Chimeras,PROTACs)技术。蛋白降解靶向嵌合体(PROTACs)是一种包含三个部分的异源双功能分子:一端与靶蛋白结合,另一端募集E3连接酶,中间起连接作用的连接链。嵌合体分子同时结合靶蛋白和泛素连接酶E3,诱导形成目标蛋白/PROTACs/E3三元复合物,导致靶蛋白的泛素化和之后的降解。PROTACs技术是一种快速、可逆的蛋白敲除方法,与泛素-蛋白酶体系统(Ubiquitin-Proteasomes System,UPS)联合作用实现蛋白质水...

【文章页数】：87 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第1章 绪论
    1.1 研究背景
    1.2 蛋白降解靶向嵌合体(PROTACs)研究进展
        1.2.1 肽类蛋白降解靶向嵌合体
        1.2.2 小分子蛋白降解靶向嵌合体
        1.2.3 蛋白降解靶向嵌合体优点
        1.2.4 蛋白降解靶向嵌合体应用
    1.3 课题设计
第2章 靶向PLK1/BRD4 蛋白的PROTACs-HBL化合物合成
    2.1 试剂和仪器
        2.1.1 试剂
        2.1.2 仪器
    2.2 化合物合成
        2.2.1 BI2536 中间体合成
        2.2.2 PROTACs-HBL合成
    2.3 结果和分析
    2.4 本章小结
第3章 PROTACs-HBL化合物与细胞作用的研究
    3.1 材料与仪器
        3.1.1 细胞株
        3.1.2 材料
        3.1.3 仪器
    3.2 实验方法
        3.2.1 细胞培养
        3.2.2 CCK8 法检测细胞增殖
        3.2.3 流式细胞术检测细胞凋亡
        3.2.4 PI染色法检测细胞周期
        3.2.5 Transwell细胞迁移实验
        3.2.6 Western-blot法检测蛋白表达情况
        3.2.7 RT-PCR检测基因m RNA水平变化
    3.3 统计方法
    3.4 结果与分析
        3.4.1 目标化合物对细胞增殖的影响
        3.4.2 HBL-1对MV4-11 细胞凋亡的影响
        3.4.3 HBL-1对MV4-11 细胞周期的影响
        3.4.4 HBL-1对MV4-11 细胞迁移的影响
    3.5 本章小结
第4章 HBL-1对PLK1、BRD4和c-Myc蛋白作用的研究
    4.1 材料和仪器
        4.1.1 细胞株
        4.1.2 材料
        4.1.3 仪器
    4.2 实验方法
        4.2.1 化合物在体外对蛋白表达的影响
        4.2.2 MV4-11 荷瘤小鼠模型建立和给药方法
    4.3 统计方法
    4.4 结果与分析
        4.4.1 HBL-1 浓度对体外白血病细胞中PLKl、BRD4 蛋白表达的影响
        4.4.2 HBL-1 作用时间对体外白血病细胞中PLKl、BRD4、c-Myc蛋白表达的影响
        4.4.3 HBL-1 对蛋白作用机制的研究
        4.4.4 HBL-1对MV4-11 荷瘤小鼠体内PLK1、BRD4、c-Myc蛋白表达的影响
    4.5 本章小结
第5章 讨论
第6章 结论与创新点
    6.1 结论
    6.2 创新点
参考文献
附图
作者简介及在学期间科研成果
致谢



本文编号：3873982