脑靶向Cas9-RNP纳米药物的制备及脑胶质瘤治疗

发布时间：2024-04-06 20:02

　　脑胶质瘤是常见的原发性中枢神经系统肿瘤,发病率高、致死率高。手术、放疗和化学疗法等对于脑胶质瘤患者的存活率方面并未取得重大改善,针对恶性脑胶质瘤需要开发新的治疗方法。近年来,基因组编辑通过编辑DNA序列或调节基因表达,为肿瘤治疗提供了新的解决方案。CRISPR(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats)是迄今为止最简单精确的基因组编辑机制之一。簇状规则的短回文重复序列CRISPR/Cas9可以从基因组中彻底删除一个基因,从而达到治疗疾病的效果。Cas9/sg RNA核糖核蛋白(Cas9-RNP)由Cas9蛋白和向导RNA(sg RNA)结合构成,Cas9-RNP复合物体内稳定性差、难以穿过血脑屏障(BBB)、不具有肿瘤靶向性等先天缺陷,制约其有效地应用于恶性脑胶质瘤的治疗。开发及设计Cas9-RNP脑靶向递送体系,安全、有效地递送到病灶并应用于体内治疗,对治疗恶性脑胶质瘤、改善病患预后生存具有指导意义。本论文中,我们合成一种Angiopep-2多肽修饰的含有胍基和氟基团的高分子聚合物,其能够通过胍基与Cas9-R...

【文章页数】：78 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-1CRISPR/Cas9介导的基因组编辑机制示意图[31]

1.绪论3图1-1CRISPR/Cas9介导的基因组编辑机制示意图[31]1.3CRISPR/Cas9系统的特征1.3.1基于质粒的CRISPR/Cas9以质粒的形式作为基因编辑的材料，主要来自由张锋组报道的二合一质粒（pX330）[26]。该质粒具有两个表达区域：使用U6启动子....

图1-2pX330的结构和功能[26]

脑靶向Cas9-RNP纳米药物的制备及脑胶质瘤治疗4图1-2pX330的结构和功能[26]1.3.2基于RNA的CRISPR/Cas9CRISPR/Cas9mRNA是一种具有单链结构的线性RNA，不含polyA尾巴的长度约为4,300nt。分子量约为1.38×103kDa。它包含....

图1-3有机高分子用于pCas9递送，体内抑制肿瘤生长的示意图[70]

脑靶向Cas9-RNP纳米药物的制备及脑胶质瘤治疗61.4.2有机高分子递送载体有机高分子作为载体，在CRISPR/Cas9基因编辑递送方面，已经有大量工作进行报道[65-68]。用于递送的常见载体有聚乙烯亚胺（PEI）、聚丙烯酰胺（PAM）、聚（L-赖氨酸）（PLL）等。使用P....

图1-4Lipofectamine用于Cas-RNP的递送，利用Lipofectamine2000或RNAiMAX用于超负电荷的Cas9-GFP或Cas-RNP递送[73]

1.绪论7有文献报道，利用脂质体纳米粒子可将CRISPR/Cas9递送至慢性髓样白血病细胞、中性粒细胞、B细胞和巨噬细胞中，以进行体内基因编辑[72]。近年来，已经有多种脂质体纳米粒子作为载体用于CRISPR/Cas9递送。目前，已研发出具有商业化的阳离子脂质体Lipofecta....

本文编号：3947082