蒲公英酶解抗菌肽的分析

发布时间：2024-04-25 23:23

　　为拓展蒲公英抗菌肽在抗菌类新药领域的开发应用,利用酶解法制备蒲公英抗菌肽对比蒲公英蛋白大于10 k D组分、3～10 kD组分、1～3 kD组分、小于1 kD组分的抑菌活性,根据筛选结果对抑菌活性较强的组分使用LC-MS技术进行结构解析来分析药效物质基础。结果表明:各组分对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长抑制活性顺序为酶解肽>小于1 kD组分>1～3 kD组分>3～10 kD组分>大于10 kD组分>空白对照。推断分析小于1 kD组分结构发现3个寡肽:PGYGT-T1的结构为NH₂-Asp-Val-COOH,PGYGT-T2的结构为NH₂-Asn-Glu-COOH,PGYGT-T3的结构为NH₂-Val-Arg-COOH;推断分析酶解肽结构发现3个寡肽:PGYGT-M1的结构为NH₂-PHe-Lys-COOH或NH₂-PHe-Gln-COOH,PGYGT-M2的结构为NH₂-His-Cys-COOH,PGYGT-M3的结构为NH...

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【部分图文】：

图1蒲公英不同蛋白组分及酶解肽对大肠杆菌的抑制

利用超滤分级法制备蒲公英蛋白不同分子量组分和酶解法(酶解大于10kD蛋白组分并过1kD膜)制备蒲公英抗菌肽组分，通过各组分对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌抑制活性分析，结果显示(表1;图1;图2)，各组分对两种细菌的抑制活性强弱顺序为酶解肽组分>小于1kD组分>1～3kD组分>....

图2蒲公英不同蛋白组分及酶解肽对金黄色葡萄球菌的抑制

图1蒲公英不同蛋白组分及酶解肽对大肠杆菌的抑制根据以上结果，发现蒲公英酶解肽与小于1kD组分都表现出相对较好的抑菌活性，由于两者分子量均小于1kD，初步分析两组分抑菌药效物质基础为寡肽类成分。为了深入对蒲公英抗菌肽的研究，本研究进一步应用LC-MS技术对比蒲公英小于1kD....

图3小于1kD总离子流

根据结果可知(图4A)，一级质谱图中m/z233为(M+H)+离子峰，则分子量为232，推测其可能为二肽。二级质谱中可以看出在电子碰撞解离过程中，肽键断裂后电荷保留于C-端形成的y碎片离子y1(m/z100.3),y1为C-端脱一分子羟基形成的碎片离子，初步计算出C-端分子量....

图4蒲公英寡肽PGYGT-T1(A),PGYGT-T2(B),PGYGT-T3(C)的一级和二级质谱

根据结果可知(图4C)，一级质谱图中m/z274.3为(M+H)+离子峰，则分子量为273，推测其可能为二肽。二级质谱中可以看出在电子碰撞解离过程中，肽键断裂后电荷保留于C-端形成的y碎片离子y1(m/z157),y1为C-端脱一分子羟基形成的碎片离子，初步计算出C-端分子量....

本文编号：3964380