载药三维纤维网状皮肤组织工程支架促糖尿病大鼠皮肤微血管网重建与创伤修复的研究

发布时间：2017-05-26 17:06

  本文关键词：载药三维纤维网状皮肤组织工程支架促糖尿病大鼠皮肤微血管网重建与创伤修复的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:以高压静电纺丝技术分别制备携载黄芪多糖(APS)和洛伐他汀(Lov)的三维纤维网状皮肤组织工程支架,表征支架形貌、载药量、包封率、体外药物释放行为,并将支架应用于糖尿病大鼠皮肤损伤的治疗,评价载药三维纤维网状皮肤组织工程支架对糖尿病大鼠皮肤微血管网的促修复作用与皮肤创伤的促愈合作用。方法:(1)以高压静电纺丝技术制备低、中、高三种APS携载量的三维纤维网状皮肤组织工程支架APSL-F、APSM-F、APSH-F;以扫描电子显微镜(SEM)表征支架形貌;以苯酚-浓硫酸法检测支架载药量与包封率;以链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠糖尿病发生,以背部全层皮肤切除术建立糖尿病大鼠皮肤创伤模型;分别以APSL-F、APSM-F、APSH-F、空白支架Blank-F覆盖皮肤创面(以自然愈合创面为对照);以免疫组织化学染色法(IHC)检测创面新生组织中CD105与e NOS表达;以多普勒血流计(LDF)检测创周皮肤血流变化;以苏木素-伊红染色法(HE)观察皮肤再生过程;以天狼猩红染色法(SR)观察新生皮肤胶原形成过程与胶原分型;以创面面积变化评价愈合速率。(2)以高压静电纺丝技术制备低、中、高三种Lov携载量的三维纤维网状皮肤组织工程支架LovL-F、LovM-F、LovH-F;以SEM表征支架形貌;以高效液相色谱法(HPLC)检测支架载药量、包封率及体外药物释放行为;以STZ诱导大鼠糖尿病发生,以背部全层皮肤切除术建立糖尿病大鼠皮肤创伤模型;分别以LovL-F、LovM-F、LovH-F、空白支架Blank-F覆盖糖尿病大鼠全层皮肤损伤创面(以自然愈合创面为对照);以IHC染色检测创面新生组织中CD105表达;以LDF检测创周皮肤血流变化;以HE染色观察皮肤再生过程;以SR染色观察新生皮肤胶原形成过程与胶原分型;以创面面积变化评价愈合速率。结果:(1)APSL-F、APSM-F、APSH-F与Blank-F支架均由形貌良好、无粘连、无分叉的聚合物纤维无规则排列组成,纤维直径分别为(720±110)nm、(570±120)nm、(650±180)nm、(660±130)nm各组纤维直径无显著性差异(P0.05);APSH-F、APSM-F、APSL-F支架的APS携载量分别为(5.22±0.08)%、(1.29±0.07)%、(0.127±0.006)%,包封率均在80%以上;以空白Blank-F支架覆盖创面的愈合速率与自然愈合创面没有显著性差异(P0.05),载APS支架可显著增加糖尿病大鼠皮肤创面新生组织中的CD105与e NOS阳性表达率、加快创面血管新生、提高创周血流量、加快成纤维细胞增殖和迁移、促进胶原纤维分泌和成熟、加快表皮覆盖和分化、加快创面愈合速率(P0.05),覆盖APSL-F、APSM-F、APSH-F、Blank-F支架组与自然愈合组创面的愈合时间分别为(23.1±4.7)天、(21.2±4.0)天、(17.7±2.6)天、(27.3±5.8)天、(27.2±5.0)天,载APS支架的促糖尿病皮肤创面微血管重建与促创伤愈合作用与APS携载量呈正相关。(2)LovL-F、LovM-F、LovH-F和Blank-F支架均由粗细均匀、无液滴及分叉的聚合物纤维无规则排列组成,纤维直径分别为(500±80)nm、(460±70)nm、(470±100)nm、(470±50)nm,各组纤维直径无显著性差异(P0.05);LovH-F、LovM-F、LovL-F支架的Lov携载量分别为(7.39±0.40)%、(4.13±0.10)%、(0.898±0.002)%,包封率均在80%以上;体外药物释放实验表明LovH-F、LovM-F、LovL-F支架在释放的初始10 h突释量分别为(41.99±2.05)%、(49.47±3.47)%、(37.56±1.70)%,30天累计释放量均超过80%;以空白Blank-F支架覆盖创面的愈合速率与自然愈合创面没有显著性差异(P0.05),载Lov支架可显著增强糖尿病大鼠皮肤创面新生组织CD105阳性表达率、加快创面微血管新生、提高创周皮肤血流量、促进真皮层胶原纤维分泌、加快新生上皮分化和覆盖、提高创面愈合速率(P0.05),覆盖LovL-F、LovM-F、LovH-F、Blank-F支架组与自然愈合组创面愈合时间分别为(24.1±4.7)天、(22.4±5.1)天、(19.0±2.2)天、(27.5±4.8)天、(28.1±5.2)天,载Lov支架的促糖尿病皮肤创面微血管重建与促创伤愈合作用与Lov携载量呈正相关。结论:载药三维纤维网状组织工程支架APS-F与Lov-F分别通过模拟细胞外基质三维结构与释放促血管新生活性物质促进糖尿病大鼠皮肤创面微血管网重建并加快创伤愈合。本研究的实施可为难愈性糖尿病皮肤溃疡的治疗提供新的思路与实验依据。
【关键词】：功能化皮肤组织工程支架 黄芪多糖 洛伐他汀 高压静电纺丝 难愈性糖尿病皮肤创伤 微血管病变
【学位授予单位】：安徽中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R943;R965
【目录】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-10
• 英文缩略词表10-12
• 前言12-18
• 1 糖尿病皮肤溃疡12-14
• 2 缓释给药系统14-15
• 3 高压静电纺丝技术15-18
• 第一章 载APS三维纤维网状皮肤组织工程支架促糖尿病大鼠皮肤微血管网重建与创伤修复18-45
• 1 仪器与材料18-20
• 2 实验方法20-25
• 3 结果25-41
• 4 讨论41-43
• 5 本章小结43-45
• 第二章 载Lov三维纤维网状皮肤组织工程支架促糖尿病大鼠皮肤微血管网重建与创伤修复45-68
• 1.仪器与材料45-47
• 2 实验方法47-51
• 3 结果51-65
• 4 讨论65-67
• 5 本章小结67-68
• 全文总结与展望68-70
• 参考文献70-76
• 综述76-88
• 参考文献85-88
• 个人简介88-89
• 致谢89

【参考文献】

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  本文关键词：载药三维纤维网状皮肤组织工程支架促糖尿病大鼠皮肤微血管网重建与创伤修复的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：397493