抗菌肽CGA-N12和CGA-N9对热带念珠菌细胞膜结构的影响

发布时间：2024-06-02 01:54

　　真菌耐药性一直是真菌病治疗的难题。抗菌肽多靶点作用机制有可能是解决真菌耐药性问题的最佳选择。抗菌肽CGA-N12和CGA-N9为衍生自嗜铬粒蛋白A(CGA)N端的抗念珠菌活性肽,CGA-N12由N端第65至76位氨基酸组成,CGA-N9由N端第47至55位氨基酸组成。前期研究结果表明,CGA-N12和CGA-N9在不破坏细胞膜完整性的情况下,诱导念珠菌细胞凋亡,但其对细胞膜结构的影响尚不清楚。本研究旨在探究CGA-N12和CGA-N9作用时念珠菌细胞膜结构的变化,丰富抗菌肽膜活性机制理论体系,并为将CGA-N12和CGA-N9开发成为新型抗真菌药物提供理论基础。本文通过使用荧光探针、原子力显微镜(AFM)、离子体原子发射光谱仪(ICP-OES)、紫外分光光度计等研究了CGA-N12和CGA-N9对热带念珠菌细胞膜电位、膜流动性、细胞膜表面结构、钾离子泄露、质膜中麦角甾醇的含量变化以及诱导脂质体通道孔径的影响。进一步,通过荧光染料钙黄绿素(calcein)和CF的泄漏情况,检测不同浓度CGA-N12和CGA-N9对膜完整性影响的变化规律及诱导形成通道的规律。结果表明,CGA-N12在热带...

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
1 绪论
    1.1 抗菌肽
    1.2 抗菌肽的来源
    1.3 抗菌肽的应用前景
    1.4 微生物细胞膜结构与组成
    1.5 抗菌肽的膜作用机制
        1.5.1 桶板作用机制
        1.5.2 虫孔作用机制
        1.5.3 毯式作用机制
        1.5.4 非破膜肽膜作用机制
    1.6 CGA-N12、CGA-N9 的来源及研究进展
    1.7 选题意义
2 抗菌肽CGA-N12对热带念珠菌细胞膜结构的影响
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验菌株
        2.1.2 主要使用试剂
        2.1.3 主要使用仪器
        2.1.4 主要溶液配置
    2.2 实验方法
        2.2.1 抗菌肽合成及纯化
        2.2.2 抗菌肽对热带念珠菌细胞膜结构的影响
        2.2.3 抗菌肽CGA-N12对类念珠菌细胞膜结构的影响
    2.3 实验结果
        2.3.1 CGA-N12使细胞膜流动性增加
        2.3.2 CGA-N12对细胞膜麦角固醇含量无影响
        2.3.3 细胞膜表面的结构变化
        2.3.4 细胞膜去极化
        2.3.5 K+泄漏
        2.3.6 脂质体的表征
        2.3.7 CGA-N12 诱导脂质体lucigenin泄漏
        2.3.8 CGA-N12诱导脂质体膜发生质子渗透
        2.3.9 CGA-N12 诱导脂质体CF泄漏
        2.3.10 不同浓度CGA-N12对膜通道孔径大小的影响
        2.3.11 不同浓度CGA-N12对膜结构完整性的影响
3 CGA-N9对热带念珠菌细胞膜结构的影响
    3.1 实验材料
        3.1.1 主要试剂
        3.1.2 主要仪器
        3.1.3 主要溶液配置
    3.2 实验方法
        3.2.1 抗菌肽CGA-N9对念珠菌细胞膜结构的影响
        3.2.2 抗菌肽CGA-N9对类念珠菌细胞膜结构的影响
    3.3 实验结果
        3.3.1 CGA-N9诱导钾离子外流
        3.3.2 CGA-N9不影响麦角固醇含量
        3.3.3 脂质体的CF泄漏
        3.3.4 不同浓度CGA-N9对膜通道孔径大小的影响
        3.3.5 不同浓度CGA-N9对膜结构完整性的影响
4 讨论
结论
参考文献
致谢
个人简历



本文编号：3986678