吉非罗齐参与细胞脂代谢调控的分子作用机制研究

发布时间：2017-07-05 18:15

  本文关键词：吉非罗齐参与细胞脂代谢调控的分子作用机制研究

  更多相关文章： 吉非罗齐 脂代谢 二酰甘油酯酶 转录因子

【摘要】：血脂是血浆中的中性脂肪(甘油三酯和胆固醇)和类脂(磷脂、脂、固醇、类固醇)的总称,是细胞基础代谢的必需物质。近来,由于饮食生活不当或者缺乏锻炼造成的肥胖患者越来越多,由此引发的高血脂症受到广泛关注。常用的降脂药物主要有胆酸结合树脂、他汀类、烟酸类和苯氧芳酸衍生物。其中吉非罗齐属于苯氧芳酸类,是一种较新的血脂调节剂,其作用机理主要是抑制极低密度脂蛋白(VLDL)在肝脏的合成,增加脂蛋白脂酶的活性,促进VLDL的分解代谢,从而降低TG和低密度脂蛋白的形成。但其在细胞内对脂代谢的调控机制尚不清楚,因此我们利用模式生物酵母探究吉非罗齐在细胞内对脂类代谢的调控机制。吉非罗齐处理野生型酿酒酵母by4741a后,与我们预测相反,TAG含量和脂滴数目均有显著增加。然后我们逐一检测细胞中性脂代谢通路中关键基因缺失(pah1△、tgl3△、tgl4△、tgl3△tgl4△、lro1△、are1△、are2△、dga1△、dgk1△等)后吉非罗齐的升脂效应,对比发现,DGK1敲除之后细胞内TAG和脂滴数目不再受药物的影响。初步确定DGK1p可能是吉非罗齐细胞内靶向调控的酶。由于DGK1p调控DAG生成PA,因此进一步检测吉非罗齐对细胞PA含量的影响,结果表明其可以抑制DGK1p的活性。RT-PCR检测吉非罗齐处理显著下调DGK1的表达,并且下调依赖于转录因子TUP1和CYC8;随后,实验数据表明吉非罗齐通过TUP1p-CYC8p与DGK1启动子-TATA-高度保守元件(-400bp—-200bp)结合起调控作用;同时,发现药物也可以通过上调具有转录抑制作用的转录因子TUP1、CYC8基因的表达,增强对DGK1基因启动子的抑制作用,从而降低DGK1基因的表达量,进而升高细胞内TAG的含量。最后,我们对pah1△背景下酵母必需基因超表达文库进行吉非罗齐耐受筛选鉴定,发现过表达NAF1、KIN28、RPL15A等能明显提高细胞的药物抗性,其中大部分与蛋白质的转录与翻译息息相关,为进一步研究吉非罗齐通过TUP1、CYC8调控DGK1对细胞内中性脂肪代谢调节机制奠定基础。
【关键词】：吉非罗齐 脂代谢 二酰甘油酯酶 转录因子
【学位授予单位】：东华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R96
【目录】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• 缩略语10-11
• 1 绪论11-18
• 2 实验设计方案18-19
• 2.1 实验目的、意义18
• 2.2 实验创新点18
• 2.3 实验内容18-19
• 3. 吉非罗齐对脂质代谢的影响19-34
• 3.1 材料与试剂19-20
• 3.2 方法20-21
• 3.3 结果21-32
• 3.4 讨论32-34
• 4 吉非罗齐对DGK1蛋白表达的影响34-41
• 4.1 材料与试剂34-35
• 4.2 方法35-37
• 4.3 结果37-39
• 4.4 讨论39-41
• 5 吉非罗齐对DGK1基因m RNA转录的影响41-58
• 5.1 材料与试剂41-42
• 5.2 方法42-49
• 5.3 结果49-57
• 5.4 讨论57-58
• 6 抗吉非罗齐胁迫基因筛选58-65
• 6.1 材料与试剂58-60
• 6.2 方法60-61
• 6.3 结果61-64
• 6.4 讨论64-65
• 总结65-66
• 参考文献66-72
• 学位期间的研究成果72-73
• 致谢73

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 刘英圣;;吉非罗齐致眩晕2例[J];华北煤炭医学院学报;2006年03期

2 王晓伟;;吉非罗齐合成路线图解[J];中国医药工业杂志;1990年04期

3 郑莉,陈蕾,任有明,王玉明;吉非罗齐引起呕吐、浮肿1例[J];中国现代应用药学;1999年01期

4 继彰;吉非罗齐原料及胶囊通过鉴定[J];上海医药;1994年12期

5 华琦,师树英,王亭,何士大;苯氧芳酸类血脂调节药物吉非罗齐疗效观察[J];中华内科杂志;1997年11期

6 芦金荣,马英;吉非罗齐的合成[J];中国现代应用药学;2000年02期

7 杨苏生;乐衡吉非罗齐治疗冠心病合并高脂血症的疗效观察[J];湖南中医药导报;2002年09期

8 蒋锡源;;血脂调节剂——吉非罗齐[J];湖北医药导报;1990年01期

9 李肖蓉，邵力正;国产吉非罗齐调整血脂的临床疗效观察[J];临床内科杂志;1994年01期

10 李明侠;夏春萍;蔡晓芳;康恒儒;;紫外分光光度法测定吉非罗齐含量[J];黑龙江医药;2003年03期

中国重要会议论文全文数据库 前2条

1 方莲花;王月华;何国荣;胡娟娟;杜冠华;;降脂药物-吉非罗齐合理用药初探[A];合理用药及新药评价专题研讨会日程安排与论文摘要[C];2010年

2 梁嘉碧;冯文周;田媛;张尊建;;大鼠体内吉非罗齐对米格列奈药代动力学的影响[A];2008第十一次全国临床药理学学术大会论文集[C];2008年

中国重要报纸全文数据库 前1条

1 傅德明;吉非罗齐与辛伐他汀治疗糖尿病高脂血症及对血液流变学影响的比较[N];医药经济报;2001年

中国硕士学位论文全文数据库 前4条

1 吴林;蒙脱土和高岭土对吉非罗齐的吸附特征及影响因素研究[D];中国地质大学(北京);2015年

2 刘伟伟;吉非罗齐参与细胞脂代谢调控的分子作用机制研究[D];东华大学;2016年

3 涂丽珍;吉非罗齐对高脂血症兔心肌缺血及再灌注损伤的保护作用[D];南华大学;2008年

4 黄莹洁;钾通道抑制剂减弱吉非罗齐对离体大鼠胸主动脉环的舒张作用[D];山西医科大学;2013年

，

本文编号：523032