CUMS诱导GK大鼠抑郁对沙格列汀药动学和CYP450活性影响的研究

发布时间：2017-07-07 15:11

  本文关键词：CUMS诱导GK大鼠抑郁对沙格列汀药动学和CYP450活性影响的研究

  更多相关文章： 慢性不可预见性温和应激 抑郁症 沙格列汀 CYP450 自发糖尿病大鼠

【摘要】：目的糖尿病伴有抑郁症的患者越来越多。本课题组前已发现慢性不可预见性温和应激(chronic unpredicted mild stress,CUMS)致抑郁SD大鼠改变了降糖药物米格列奈的药动学参数,为了更好地模拟糖尿病患者并发抑郁后药物代谢改变情况,本研究探讨CUMS诱导自发性糖尿病Goto Kakizaki(GK)大鼠抑郁对体内降糖药物代谢过程的影响,为临床上糖尿病并发抑郁症患者服用降糖药物的治疗方案提供理论证据。方法1、糖尿病大鼠模型的制作:5周龄雄性自发性糖尿病GK大鼠购自上海斯莱克实验动物有限公司,在SPF级实验室中饲养,直到出现多饮多食多尿的糖尿病症状,并测定大鼠餐后2 h血糖水平加以确认。2、抑郁大鼠模型的建立:将糖尿病GK大鼠随机分成两组:对照组和抑郁模型组。抑郁模型组大鼠单笼饲养,采用CUMS方法连续8周给予不同的应激,应激方法包括:束缚1 h;热水游泳(45℃,5min);冷水游泳(4℃,5min);夹尾巴1 min;笼子倾斜45°,24 h;水平摇晃10 min;潮湿垫料24 h;噪音10 min;黑白光倒置(昼夜颠倒)24 h。每天随机给予一种应激,并且避免连续给予同一种应激方法。对照组大鼠不接受任何应激。3、抑郁模型的验证:在应激造模前后,采用旷场试验(open-field test)和酶联免疫吸附试验(ELISA)测定抑郁模型组和对照组的行为学得分(水平运动得分和垂直运动得分)和血浆中5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)水平,验证CUMS诱导抑郁模型的成功建立。4、沙格列汀药动学分析:抑郁模型建立后,抑郁组和对照组大鼠分别给予新型降糖药物沙格列汀(0.5 mg/kg)灌胃,并在不同的时间点采血。采用高效液相串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定血浆中沙格列汀的血药浓度并计算药动学参数。5、CYP450活性的测定:将所有大鼠处死,取出肝脏,利用差速离心法制备肝微粒体混悬液,并测定肝微粒体总蛋白的浓度。采用“Cocktail”探针药物法测定探针药物经肝微粒体CYP1A/2C/2D/3A代谢生成的代谢物的含量,来反映相应的CYP450各亚型的活性。结果1、自发性糖尿病GK大鼠在12周龄产生多饮多食多尿的糖尿病症状。大鼠餐后2 h血糖水平是17.51±5.52 mmol/L,高于理论值11 mmol/L。抑郁组GK大鼠在应激造模前后,旷场试验的行为学(水平运动得分和垂直运动得分)和血浆中5-HT、DA水平均显著性的降低(P0.01)。和对照组相比,抑郁组大鼠精神状态萎靡,对应激反应不强烈、活动和体重均下降。2、HPLC-MS/MS检测血浆中沙格列汀的方法特异性好、灵敏度高,介质效应、检测限、准确度和精密度均符合生物样品检测要求。与对照组相比,抑郁组GK大鼠沙格列汀的药动学参数有明显的改变。曲线下面积、达峰时间、峰浓度、平均滞留时间和清除率在统计学上有意义(P0.05),但半衰期和表观分布容积没有显著性差异。3、在抑郁组和对照组两组间肝微粒体总蛋白的浓度有明显的差异。HPLC-MS/MS检测探针的代谢物方法快速灵敏、简单易行,介质效应、提取回收率、准确度和精密度都符合生物样品检测要求。两组间代谢物的浓度以及CYP450活性均有显著性的差异。不同的CYP450亚型活性的变化趋势与调节幅度都不同。与对照组相比,抑郁组肝微粒体CYP3A的活性发生显著性的增加。结论1、CUMS诱导GK大鼠抑郁改变了沙格列汀在体内的代谢过程、肝微粒体总蛋白浓度和CYP各亚型活性。2、肝微粒体和沙格列汀的体外试验验证了沙格列汀药动学的改变是由肝脏药物代谢酶CYP450活性改变引起的。3、CUMS诱导GK大鼠抑郁对不同的CYP450亚型活性的变化趋势与调节幅度不同。
【关键词】：慢性不可预见性温和应激 抑郁症 沙格列汀 CYP450 自发糖尿病大鼠
【学位授予单位】：锦州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R965
【目录】：

• 中文论著摘要5-8
• 英文论著摘要8-12
• 英文缩略语12-14
• 前言14-17
• 第一章 CUMS诱导GK大鼠抑郁模型的建立17-23
• 一、引言17
• 二、实验材料17-18
• 三、实验方法18-19
• 四、实验结果19-23
• 第二章 沙格列汀药动学分析23-36
• 一、引言23
• 二、实验材料23-24
• 三、实验方法24-27
• 四、实验结果27-36
• 第三章“Cocktail”探针药物法测定CYP450的活性36-53
• 一、引言36
• 二、实验材料36-37
• 三、实验方法37-43
• 四、实验结果43-53
• 讨论53-56
• 结论56-57
• 本研究创新性的自我评价57-58
• 参考文献58-63
• 附录63-74
• 一、文献综述 心理应激对药物代谢的影响63-71
• 参考文献66-71
• 二、在学期间科研成绩71-72
• 三、致谢72-73
• 四、个人简介73-74

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 陈同度,张昌颖;素食大鼠的贫血现象[J];营养学报;1957年04期

2 陈伟强;赵善广;;自制注射用大鼠固定装置[J];上海实验动物科学;1992年04期

3 肖柳英,林培英,冯昭明,张丹;不同周龄的SD大鼠生理、生化及体重的正常值测定[J];中药新药与临床药理;1996年03期

4 李淑云;简易大鼠灌胃器的制作[J];锦州医学院学报;2001年04期

5 杨明智,陈积圣;一种大鼠抓取与固定的新工具介绍[J];上海实验动物科学;2001年03期

6 戴英,陆群;复方H_(505)对Wistar大鼠外周血的血液流变学指标的影响[J];中国血液流变学杂志;2001年01期

7 韦应波,孙喜庆,曹新生,姚永杰,冯岱雅,杨长斌;+Gz暴露时间对大鼠记忆功能和行为的影响[J];航天医学与医学工程;2003年01期

8 吕学军,郭俊生,李敏,周利梅,张永娟;晕船大鼠体内铁含量的变化[J];中国职业医学;2003年04期

9 汤仁仙,王迎伟,王慧,周峰;201A中药合剂对大鼠抗肾小球基底膜肾炎病变的影响[J];徐州医学院学报;2003年06期

10 孙同柱,付小兵,翁立新,梁雪梅,陈伟;介绍一种简易的大鼠保定方法[J];上海实验动物科学;2004年01期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 尹音;孙振宇;胡敏;李冬霞;;持续性高正加速度对大鼠颞颌关节损伤的作用[A];第八届全国颞下颌关节病学及（牙合）学大会论文汇编[C];2011年

2 祝~=骧;iJ梊霞;洃克琴;崔素英;文允摪;，

本文编号：530711