天青蛋白基因在酮古龙酸菌中的克隆与表达

发布时间：2017-07-31 03:22

  本文关键词：天青蛋白基因在酮古龙酸菌中的克隆与表达

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【摘要】：目的克隆来源于脱氮副球菌的天青蛋白基因(pden1359),并在酮古龙酸菌(Ketogulonicigenium sp.)Rif-B-003中表达。方法利用酶切酶连的方法构建重组质粒pBBR1 MCS-2-pden1359,并以接合转移的方法将重组质粒导入到菌株Rif-B-003中。采用双酶切、PCR验证获得阳性重组菌Rif-B-003/pBBR1 MCS-2-pden1359,SDS-PAGE检测Pden1359的蛋白表达,分光光度法检测菌体内过氧化氢和超氧阴离子浓度。结果成功构建重组质粒pBBR1 MCS-2-pden1359并导入菌株RifB-003中获得重组菌Rif-B-003/pBBR1 MCS-2-pden1359,重组菌体SDS-PAGE显示在目的蛋白处有表达条带。在发酵各个时期,重组菌株比对照菌株Rif-B-003体内过氧化氢浓度均降低,最多降低1.05×10-8umol·cfu~(-1)(16.21%),超氧阴离子浓度也降低,最多降低8.52×10~(-1)1umol·cfu~(-1)(13.98%)。结论来源于脱氮副球菌的天青蛋白基因pden1359在酮古龙酸菌Rif-B-003中成功表达,可以降低菌体内活性氧水平。
【作者单位】： 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院;东北制药集团公司;
【关键词】： 脱氮副球菌 天青蛋白基因 酮古龙酸菌 -酮基-L-古龙酸
【基金】：国家自然科学基金资助项目(31370125)
【分类号】：R977.2
【正文快照】： 维生素C(L-抗坏血酸,vitamin C)是一种水溶性维生素,既是营养强化剂,又可以作为功能性的抗氧化剂。“维生素C二步发酵法”是我国独创的生产工艺,包括2个步骤:第一步为醇糖转化,是在氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter oxy-dans)的作用下将D-山梨醇氧化为L-山梨糖,其转化机制和相，

本文编号：597297