1,25-羟基维生素D2注射用纳米乳剂的研究

发布时间：2017-08-21 19:13

  本文关键词：1,25-羟基维生素D2注射用纳米乳剂的研究

  更多相关文章： 1 25-羟基维生素D2 注射用纳米乳剂 继发性甲状旁腺功能亢进症

【摘要】：1,25-羟基维生素D2是维生素D2的合成衍生物,用于继发性甲状旁腺功能亢进症(SHPT)的治疗,因其较少引起高血钙、高血磷等毒副作用而引起关注。目前上市的剂型有软胶囊剂、注射剂。由于1,25-羟基维生素D2难溶于水,因而增大其水中溶解度成为研究的重点与难点。本研究根据药物的理化性质、药理作用和静脉注射给药的特点,首次研究开发了1,25-羟基维生素D2新型注射用纳米乳剂,解决了药物难溶于水的问题,与现有的上市注射液相比,不但可以增加药物的稳定性,而且显著减少表面活性剂和有机溶剂的用量,从而降低毒副作用,增加临床适用性。该注射用纳米乳剂质量可控、工艺简单、物理化学性质稳定,为1,25-羟基维生素D2药物新剂型的开发奠定了基础。在处方前研究中,根据纳米乳剂的剂型特点及1,25-羟基维生素D2自身理化性质,考察了1,25-羟基维生素D2在不同溶媒与油相中的溶解情况,并建立了高效液相色谱法测定1,25-羟基维生素D2的含量及有关物质。由紫外分光光度计扫描可得,1,25-羟基维生素D2在265nm有最大吸收峰,降解产物在274nm有最大吸收峰,最终确定265nm作为药物含量检测的波长,274nm为有关物质检测的波长,色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶作为固定相;以乙腈-水(85:15)作为流动相。以峰面积(A)对浓度(C)进行线性回归,得回归方程A=201098C-8412.5(R2=0.9998,n=9),说明1,25-羟基维生素D2在0.06~4.00μg/m L范围内具有良好的线性关系,通过回收率试验、重复性试验、精密度试验及样品溶液的稳定性研究表明该方法有较高的精密度、准确度及重现性,各辅料对主药的检测无干扰作用,可用于1,25-羟基维生素D2注射用纳米乳剂的含量及有关物质的测定,为后续注射用纳米乳剂的质量控制和稳定性研究奠定了基础。通过单因素试验考察处方中各组成成分、用量对1,25-羟基维生素D2溶解性的影响,1,25-羟基维生素D2在不同的表面活性剂、助表面活性剂、油相中的溶解性不同,筛选出1,25-羟基维生素D2溶解性较大的表面活性剂、助表面活性剂及油相,绘制三元相图筛选纳米乳的形成区域,通过各处方对纳米乳剂成乳效果的影响,筛选出纳米乳中表面活性剂、助表面活性剂及油相的最佳配比以及制备工艺参数,再通过溶解性以及稳定性的考察,确定最优处方,并在此基础上进行了处方的工艺验证,最终确定最优处方以Tween80(吐温80)作为表面活性剂、乙醇作为助表面活性剂、中链甘油三酯(MCT)作为油相。由于1,25-羟基维生素D2自身理化性质,该药氧化条件下不稳定,易氧化发生降解,应加入抗氧剂,由稳定性考察结果,最终确定加入2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)作为抗氧剂。按照优选处方制备注射用纳米乳剂,对其含量、有关物质、pH值、粒径、Zeta电位、渗透压等各项指标进行测定,所制备的纳米乳剂的粒径为20~50nm之间,注射用纳米乳剂pH值在6~8之间,渗透压在285~340mOsmol/Kg之间,确定注射用纳米乳剂的质量标准。对1,25-羟基维生素D2注射用纳米乳剂的稳定性进行了初步研究,结果表明,1,25-羟基维生素D2对光照、温度比较敏感,在光照、高温条件下易发生降解,因此该注射用纳米乳剂需在低温、避光的条件储存;模拟上市包装的条件下,进行了加速(25℃)6个月稳定性考察,结果表明杂质A(1,25-羟基维生素D2的光学异构体)明显增加,其他指标均符合规定。长期(4-8℃)稳定性考察6个月,含量、有关物质等各项指标均符合规定。通过稳定性对比研究结果表明,与上市注射液对比,注射用纳米乳稳定性更高,室温25℃放置1个月,上市注射液含量降低了3.41%,有关物质含量升高到3.29%;注射用纳米乳剂的含量降低了1.65%,有关物质含量升高到0.98%。40℃放置10天,上市注射液含量降低了5.64%,有关物质含量升高到5.96%;注射用纳米乳剂的含量降低到3.68%,有关物质含量升高到3.71%,可见注射用纳米乳剂相较于上市注射液稳定性更高。与上市注射液组成对比,上市注射液中表面活性剂为1%和助溶剂为5%,注射用纳米乳剂表面活性剂仅占0.35%,助溶剂仅占0.075%,降低了表面活性剂与助溶剂的使用量,提高了临床适应性。与上市注射液对比,对注射用纳米乳剂的溶血性及血管刺激性进行体内安全性评价。由血管刺激性试验结果显示,在低中高三个剂量下,本品给药后48h,96h后注射部位均无红肿,充血等刺激性;上市注射液在高剂量下,血管出现轻微红肿现象;由病理切片结果显示,上市注射液高剂量组出现明显的嗜酸性粒细胞升高现象,炎症反应明显,血管内皮出现轻微破损现象,证明上市注射液在高剂量下对血管具有一定刺激性;而本品高剂量条件下未发现明显的炎症反应,且血管壁完整,说明与上市注射液相比,1,25-羟基维生素D2注射用纳米乳剂可以明显降低血管刺激性。由溶血性试验结果可见,本品无溶血性反应。综上所述,本文将1,25-羟基维生素D2制成注射用纳米乳剂,不仅提高了1,25-羟基维生素D2在水中的溶解度,且显著减少了表面活性剂及有机溶剂的使用量,从而降低血管刺激性等毒副作用,并提高了药物的稳定性,本剂型制备工艺简单、质量可控、物理化学性质稳定、使用方便,达到该研究的实验设计目的。
【关键词】：1 25-羟基维生素D2 注射用纳米乳剂 继发性甲状旁腺功能亢进症
【学位授予单位】：中国人民解放军军事医学科学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R943
【目录】：

• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 前言10-16
• 1 研究背景10-12
• 1.1 继发性甲状旁腺功能亢进症10
• 1.2 上市药物简介10-12
• 2 1,25-羟基维生素D2的性质研究12-13
• 2.1 1,25-羟基维生素D2的理化性质12
• 2.2 1,25-羟基维生素 D2 的药理作用12-13
• 3 注射用纳米乳剂13-15
• 3.1 纳米乳剂简介13
• 3.2 纳米乳剂使用的辅料13-14
• 3.3 注射用纳米乳剂的质量评价14-15
• 4 立题依据15-16
• 第一章 处方前研究16-37
• 1 仪器与试药16-17
• 1.1 仪器16
• 1.2 试药16-17
• 2 方法和结果17-35
• 2.1 含量测定的方法建立17-25
• 2.2 有关物质的方法学建立25-34
• 2.3 1,25-羟基维生素D2的溶解性试验34-35
• 3 讨论35
• 4 小结35-37
• 第二章 处方工艺的研究37-44
• 1 仪器与试药37-38
• 1.1 仪器37
• 1.2 试药37-38
• 2 方法与结果38-43
• 2.1 油相与表面活性剂的相容性试验38
• 2.2 三元相图的绘制38-40
• 2.3 处方筛选40-42
• 2.4 处方工艺的最终确定42
• 2.5 注射用纳米乳剂与上市注射液的成分比较42-43
• 3 讨论43
• 4 小结43-44
• 第三章 注射用纳米乳剂的质量研究44-55
• 1 仪器与试药44-45
• 1.1 仪器44
• 1.2 试药44-45
• 2 方法与结果45-53
• 2.1 质量标准45-46
• 2.2 注射用纳米乳剂的含量及有关物质的检测46-51
• 2.3 注射用纳米乳剂附加剂的检测51-53
• 3 讨论53-54
• 4 小结54-55
• 第四章 注射用纳米乳剂稳定性研究55-63
• 1 仪器与试药55
• 1.1 仪器55
• 1.2 试药55
• 2 方法与结果55-62
• 2.1 影响因素试验56-57
• 2.1.1 光照试验56
• 2.1.2 高温试验56-57
• 2.2 加速试验57-59
• 2.3 长期试验59-61
• 2.4 注射用纳米乳剂与上市注射液稳定性比较61-62
• 3 讨论62
• 4 小结62-63
• 第五章 安全性评价63-69
• 1 仪器与试药63
• 1.1 仪器63
• 1.2 试药63
• 2 方法与结果63-67
• 2.1 溶血性试验63-65
• 2.2 刺激性试验65-67
• 3 讨论67
• 4 小结67-69
• 全文总结69-71
• 参考文献71-74
• 致谢74-75
• 个人简历75

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 戴杰;程亮;程丽芳;陈大为;张文芳;;LY294002白蛋白结合型纳米注射剂的制备与性质[J];中国新药杂志;2013年14期

2 严金柱;孙艺萍;谭燕玲;;运用Box-Behnken设计-效应面法对尼莫地平纳米乳剂处方工艺的优化[J];抗感染药学;2013年03期

3 ;[J];;年期

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 林东海;韩朝武;李金明;;莪术挥发油亚纳米乳剂的制备与稳定性的研究[A];创新药物及新品种研究、开发学术研讨会论文集[C];2006年

中国博士学位论文全文数据库 前2条

1 王嘉军;蜂胶—银离子复合纳米乳剂的研制及其生物活性的检测[D];中国人民解放军军事医学科学院;2006年

2 李学民;维生素A牛至油大蒜素复合纳米乳剂的研制与应用[D];中国农业大学;2015年

中国硕士学位论文全文数据库 前9条

1 李琳;1,25-羟基维生素D2注射用纳米乳剂的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2016年

2 魏守刚;齐多夫定棕榈酸酯纳米乳剂的研究[D];沈阳药科大学;2005年

3 李微;辅酶Q_（10）静脉注射纳米乳剂研究[D];吉林大学;2005年

4 贾立红;脂溶性茶多酚静脉纳米乳剂的制备[D];吉林大学;2006年

5 曹海燕;维生素E静脉纳米乳剂的制备与研究[D];吉林大学;2005年

6 郝锦峰;维生素D静脉纳米乳剂的制备与研究[D];吉林大学;2006年

7 苏维彪;维生素A静脉纳米乳剂的制备与研究[D];吉林大学;2006年

8 田云龙;辛香喷鼻纳米乳剂治疗儿童变应性鼻炎的临床研究[D];南京中医药大学;2013年

9 陈芹芹;纳米乳剂与天冬等5种中草药提取物对流感灭活疫苗的佐剂效应研究[D];北京协和医学院;2011年

，

本文编号：714619