4-氨基水杨酸葡萄糖苷的体内外评价及药效学研究

发布时间：2017-08-31 04:15

  本文关键词：4-氨基水杨酸葡萄糖苷的体内外评价及药效学研究

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【摘要】：目的:基于高效液相色谱法(HPLC)建立4-氨基水杨酸(4-aminosallcylicacid,4-ASA)和4-乙酰氨基水杨酸(4-acetamidosalicylic acid,Ac-4-ASA)的含量测定方法。对4-氨基水杨酸葡萄糖苷(4-aminosalicylic acid-glucoside,4-ASA-Glu)进行p H稳定性考察,评价其在体内外结肠靶向释药特性及对溃疡性结肠炎大鼠的治疗作用,为后续研究提供实验基础。方法:本文采用HPLC建立4-ASA和Ac-4-ASA的含量测定方法。分别以0.1M HCl、p H6.8磷酸盐缓冲液、p H7.4磷酸盐缓冲液为释放介质,测定4-ASA-Glu在12 h内的稳定性。采用HPLC,以4-ASA累积释放率为评价指标,分别考察4-ASA-Glu(相当于4-ASA 250μg/m L)在正常和溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠胃、小肠、盲肠、结肠内容物液中,37℃水浴孵育不同时间后的释药行为。将4-ASA-Glu大鼠灌胃给药,分别于0.5 h、l h、2 h、4 h、6 h、8 h、12 h各时间点采集大鼠胃、小肠、盲肠和结肠段的内容物和血浆样品,HPLC法检测大鼠各段胃肠道血浆和内容物中4-ASA和Ac-4-ASA的经时变化。采用2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-Trinitro-Benzenesulfonic acid,TNBS)建立UC大鼠模型进行药效学研究。结果:4-ASA在2.0-200.0μg/m L范围内,线性关系良好(r0.995),方法回收率为(89.54±0.60)%~(97.02±0.20)%,日内RSD小于4.58%,日间RSD小于5.48%。Ac-4-ASA的线性范围为2.0-100.0μg/m L,线性关系良好(r0.991),回收率(88.43±0.16)%~(109.99±2.49)%,日内RSD小于4.92%,日间RSD小于6.70%。稳定性结果表明,4-ASA-Glu在不同p H值的缓冲液中几乎不释放4-ASA,稳定性良好。体外结果表明在正常和UC大鼠的胃与小肠的内容物溶液中释药量均小于8%;在正常盲肠和结肠内容物溶液中孵育12 h累积释放率分别为69%和79%;在模型盲肠和结肠内容物溶液中孵育12 h后其分别为55%和74%。体内结果显示4-ASA-Glu 12 h内在大鼠胃和小肠腔道内基本无4-ASA的分布,4-ASA主要分布于大鼠的盲肠和结肠部位。药效学实验结果显示用TNBS诱导结肠炎后给予柳氮磺胺吡啶(Sulfasalazine,SASP)、4-ASA-Glu、4-氨基水杨酸(4-aminosallcylicacid,4-ASA)、5-氨基水杨酸(5-aminosalicylic acid,5-ASA)后,大鼠炎症程度明显减轻。与UC模型组对比,4-ASA-Glu对疾病活动指数(DAI)评分和病理学改变可明显改善,降低结肠指数及大体评分,抑制髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性。结论:4-氨基水杨酸葡萄糖苷能够在盲结肠内容物的作用下释放母药4-氨基水杨酸,具有一定的结肠定位释药特性,起到治疗UC的作用。
【关键词】：溃疡性结肠炎 4-氨基水杨酸 4-氨基水杨酸葡萄糖苷 口服结肠定位给药系统 体内外评价 药效学
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R927;R965
【目录】：

• 中文摘要8-10
• 英文摘要10-12
• 前言12-14
• 第一部分 分析方法的建立14-24
• 1 材料与方法14-18
• 1.1 仪器14
• 1.2 药品与试剂14
• 1.3 动物14
• 1.4 检测波长的选择14-15
• 1.5 色谱条件15
• 1.6 贮备液的制备15-16
• 1.7 生物样品的处理16
• 1.8 方法专属性16-17
• 1.9 线性关系的考察17
• 1.10 准确度和精密度试验17-18
• 2 结果18-22
• 2.1 检测波长的选择18
• 2.2 方法专属性18-19
• 2.3 线性关系的考察19-20
• 2.4 准确度和精密度试验20-22
• 3 讨论22-23
• 3.1 检测方法选择22
• 3.2 色谱条件优化22
• 3.3 血浆样品处理22-23
• 4 结论23-24
• 4.1 建立了 4-ASA含量测定分析方法23
• 4.2 建立了Ac4ASA含量测定分析方法23-24
• 第二部分 4-氨基水杨酸葡萄糖苷体外靶向释药研究24-30
• 1 材料与方法24-26
• 1.1 仪器24
• 1.2 药品与试剂24
• 1.3 动物24
• 1.4 4-氨基水杨酸葡萄糖苷在不同pH缓冲液的稳定性24
• 1.5 4-氨基水杨酸葡萄糖苷在正常大鼠内容物液中的体外孵育试验24-25
• 1.6 4-氨基水杨酸葡萄糖苷在溃疡性结肠炎模型大鼠胃肠道内容物液中的体外孵化实验25-26
• 2 结果26-28
• 2.1 4-氨基水杨酸葡萄糖苷在不同pH缓冲液的稳定性26
• 2.2 4-氨基水杨酸葡萄糖苷在正常大鼠内容物液中的体外孵育试验26-27
• 2.3 4-氨基水杨酸葡萄糖苷在溃疡性结肠炎模型大鼠胃肠道内容物液中的体外孵化实验27-28
• 3 讨论28-29
• 3.1 乙酰化酶28
• 3.2 体外释药原因28-29
• 4 结论29-30
• 4.1 体外释药原因探讨29
• 4.2 4-ASA-Glu在体外结肠内容物液中靶向释药29-30
• 第三部分 4-氨基水杨酸葡萄糖苷体内靶向释药研究30-35
• 1 材料与方法30-32
• 1.1 仪器30
• 1.2 药品与试剂30
• 1.3 动物30
• 1.4 实验设计30
• 1.5 样品的处理30-32
• 2 结果32-33
• 2.1 体内血浆中药物释放率32
• 2.2 体内靶向释放率32-33
• 3 讨论33-34
• 3.1 血浆和组织中药物33
• 3.2 体内释放部位33-34
• 4 结论34-35
• 4.1 体内释药原因探讨34
• 4.2 4-ASA-Glu在体内结肠内容物液中靶向释药34-35
• 第四部分 4-氨基水杨酸葡萄糖苷对TNBS诱导大鼠溃疡性结肠炎模型的药效学研35-46
• 1 材料与方法35-40
• 1.1 仪器35
• 1.2 药品与试剂35-36
• 1.3 动物36
• 1.4 试剂的配制36
• 1.5 动物分组饲养36
• 1.6 2,4,6-三硝基苯磺酸诱导建立大鼠结肠炎模型36
• 1.7 给药剂量36-37
• 1.8 大鼠结肠炎炎症指标的建立37-39
• 1.9 统计学处理39-40
• 2 结果40-44
• 2.1 DAI评分40
• 2.2 标本懫集及结肠/体重比、大体评分40-42
• 2.3 组织HE染色及评分标准42-43
• 2.4 髓过氧化物酶（MPO）活性检测43-44
• 3 讨论44-45
• 3.1 动物模型选择44
• 3.2 造模液剂量选择44-45
• 4 结论45-46
• 4.1 建立了TNBS诱导的大鼠UC模型45
• 4.2 建立了大鼠结肠炎炎症指标45-46
• 参考文献46-49
• 综述49-56
• 参考文献54-56
• 致谢56-57
• 在学期间承担/参与的科研课题与研究成果57-58
• 个人简历58

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 高志静;;抗溃疡性结肠炎5-氨基水杨酸类药物的研究进展[J];长治医学院学报;2010年01期

2 邹海艳;王玉蓉;姜丽;;pH-酶触型盐酸小檗碱结肠定位片大鼠体内的释药研究[J];辽宁中医药大学学报;2011年05期

3 李国法;郑红斌;;短链脂肪酸对结肠病变及作用机制的影响[J];世界华人消化杂志;2010年32期

4 王艳红;葛斌;陈佳佳;李思佳;王晓;吴勇杰;;溃疡性结肠炎动物模型的研究进展[J];中国药房;2011年25期

5 Hirokazu Okamoto;Kazumi Danjo;;Colon-specific drug delivery systems based on cyclodextrin prod rugs: In vivo evaluation of 5-aminosalicylic acid from its cyclodextrin conjugates[J];World Journal of Gastroenterology;2005年47期

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本文编号：763389