破伤风梭菌无动物源培养基发酵及纯化工艺的探索

发布时间：2017-09-14 07:20

  本文关键词：破伤风梭菌无动物源培养基发酵及纯化工艺的探索

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【摘要】：目的:开发优化破伤风梭菌无动物源培养基;摸索层析法纯化破伤风毒素的工艺。方法:分别用蛋白胨和酵母浸出物替代培养基中动物源性成分作为氮源。2 L发酵罐发酵比较菌体生长密度和产毒量;发酵液经离心,切向流过滤回收,通过柱层析方法对发酵回收液进行纯化。柱层析时比较不同洗脱条件下毒素回收率。结果:蛋白胨可更好的供菌体生长,但产毒量较低;酵母浸出物可作为氮源供菌体生长,菌体浓度相对较低,但最高产毒量可达52 Lf·m L-1;阴离子柱层析纯化可使破伤风毒素纯度大幅提高,毒素回收率在80%左右。结论:无动物源培养基发酵破伤风梭菌有高产毒量,阴离子柱层析可作为破伤风毒素纯化方法。
【作者单位】： 天津科技大学;天津康希诺生物技术有限公司天津市呼吸道细菌重组及结合疫苗企业重点实验室;
【关键词】： 破伤风梭菌 无动物源 酵母浸出物 蛋白胨 阴离子交换层析
【基金】：国家“重大新药创制”科技重大专项(2015ZX09102009)
【分类号】：R915
【正文快照】： 及结合疫苗企业重点实验室,天津300457)破伤风梭菌在厌氧条件下可产生破伤风痉挛毒素(以下简称破伤风毒素),在没有经过免疫的人群中依然有高感染率和高死亡率[1]。破伤风毒素为蛋白质,理论相对分子质量为158 000[2]。从我国2008-2009年调查情况来看,新生儿破伤风发病率呈逐年

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本文编号：848643