普罗布考对PAN致足细胞损伤模型中mTOR及氧化应激水平影响

发布时间：2017-10-07 22:37

  本文关键词：普罗布考对PAN致足细胞损伤模型中mTOR及氧化应激水平影响

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【摘要】：目的观察普罗布考对氨基核苷嘌呤霉素(PAN)致小鼠永生化足细胞损伤模型哺乳类动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及氧化应激水平的影响,探讨普罗布考的肾脏保护作用机制。方法 PAN刺激体外培养的足细胞24h,建立足细胞损伤模型。采用CCK-8方法检测不同浓度普罗布考作用下PAN损伤足细胞的细胞存活率。将足细胞随机分为正常组、PAN组(PAN 50mg/L)、普罗布考组(PAN 50mg/L+普罗布考40μmol/L),予以相应药物刺激24h。采用荧光酶标仪检测DCFH-DA荧光探针标记的足细胞中活性氧(ROS)水平的变化。采用荧光显微镜检测DCFH-DA荧光探针标记的足细胞荧光强度的变化。采用Western-blot方法检测各组足细胞mTOR蛋白表达水平。结果 CCK-8方法检测结果显示,PAN造成足细胞损伤后加入浓度为20、40、100μmol/L普罗布考均使足细胞活性上升,与0μmol/L普罗布考组比较,差异有显著性(F=1 959.00,P0.05),其浓度为40μmol/L时作用最明显。荧光显微镜检测结果显示,PAN组足细胞内荧光强度增强。DCF荧光强度检测结果显示,PAN组细胞内ROS生成明显升高,与正常组比较,差异有显著性(F=33 525.19,P0.05);普罗布考组ROS生成明显减少,与PAN组比较,差异有显著性(P0.05)。Western-blot方法检测结果显示,PAN可使mTOR表达水平明显升高,与正常组比较,差异有显著性(F=179.55,P0.05);普罗布考40μmol/L共处理细胞后,mTOR表达水平下降,与PAN组比较,差异有显著性(P0.05)。结论普罗布考可通过下调PAN导致的mTOR激活,降低ROS生成,减轻氧化应激水平,从而抑制足细胞损伤。
【作者单位】： 青岛大学附属医院肾病内科;
【关键词】： 普罗布考 嘌呤霉素 足细胞 他克莫司结合蛋白质类 氧化性应激
【基金】：青岛市科技局课题(11-2-3-1-(2)-nsh)
【分类号】：R965
【正文快照】： 普罗布考具有抗氧化、抗炎、稳定动脉粥样硬化斑块、改善血管内皮功能、抑制内膜增生及预防术后狭窄等作用。与心血管疾病相似,氧化应激在终末期肾病中同样发挥着重要的作用。活性氧(ROS)主要来源于浸润的中性粒细胞、单核细胞和肾脏的固有细胞,ROS可以通过一系列作用机制导致

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本文编号：990506