共轭亚油酸甘油酯检测方法的建立及降脂功能研究

发布时间：2017-10-14 20:30

  本文关键词：共轭亚油酸甘油酯检测方法的建立及降脂功能研究

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【摘要】：目的:本研究旨在通过高脂模型大鼠干预方式探讨共轭亚油酸甘油酯的降脂机制,为其降脂功效提供理论依据。并采用高效液相色谱仪-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)建立共轭亚油酸甘油酯的检测分析方法。方法:降脂功能研究选用清洁级Sprague-Dawley(SD)大鼠72只,随机分为6组:基础对照组,高脂对照组,鱼油对照组,共轭亚油酸甘油酯低(2g/kg·bw)中(4g/kg·bw)、高(6g/kg·bw)剂量组,除基础对照组摄食基础饲料外,其余各对照组均摄食高脂饲料,建立高脂模型,每天以灌胃方式给予大鼠受试物,每周定时称体重,6周后大鼠麻醉处死,比较各组间体重变化;留取大鼠肝脏组织,经HE染色后光镜下观察肝组织有无病理变化;检测血清中血脂水平,血中脂肪酸组成,血糖值,血清抗氧化程度等指标。采用高效液相色谱仪-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD),用Zorbax硅胶色谱柱,正己烷-异丙醇为流动相,控制其不同配比,建立共轭亚油酸甘油酯检测分析方法,使共轭亚油酸甘油一酯、甘油二酯和甘油三酯达到完全分离。结果:从干预第3周开始,与高脂对照组比较,共轭亚油酸甘油酯低、中、高剂量组大鼠体重开始下降,但无显著性差异,第5、6周与高脂对照组和基础对照组比较,共轭亚油酸甘油酯中、高剂量组体重显著性下降(p0.05);肝脏HE染色后显示,共轭亚油酸甘油酯高剂量组脂肪肝程度较高脂对照组明显减轻,仅有少量炎性细胞浸润;共轭亚油酸甘油酯各剂量组大鼠的脂体比和Lee’s指数与高脂对照组比较呈下降趋势;共轭亚油酸甘油酯低、中、高剂量组TC、TG、LDL-C水平与高脂对照组比较显著性降低,HDL-C水平显著性升高(p0.05);与高脂对照组比较,共轭亚油酸甘油酯中、高剂量组大鼠的血清中总饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸水平显著性升高,而单不饱和脂肪酸水平显著性下降(p0.05);共轭亚油酸甘油酯各剂量组大鼠的血糖值与高脂对照组比较显著性下降(p0.05);与高脂对照组比较,共轭亚油酸甘油酯低、中、高剂量组SOD、GSH-PX活力显著性升高(p0.05),高剂量组MDA含量显著性下降(p0.05)。HPLC-ELSD检测方法下,共轭亚油酸甘油三酯、甘油二酯、甘油一酯分别在4.62min、7.78min、13.80min时间段成功分离,且分离度良好;检测结果显示,共轭亚油酸甘油酯样品中三甘酯、二甘酯和单甘酯含量分别为79.8%,19.8%,0.89%;各甘油酯的相对标准偏差(RSD)均小于2%,方法精密度良好,甘油三酯、甘油二酯和甘油一酯的检测限分别为0.6mg/kg、2.0mg/kg、2.5mg/kg,定量限分别为6.0mg/kg、12.0mg/kg、12.0mg/kg。结论:共轭亚油酸甘油酯能够起到缓解脂肪肝、减肥的作用,并能控制高脂血症、糖尿病患者的病情,减少体内脂质过氧化物产生,缓解脂质代谢紊乱。成功建立HPLC-ELSD检测方法,该检测条件下共轭亚油酸甘油三酯、甘油二酯、甘油一酯分离度良好,本方法精密度、重现性良好,适用于共轭亚油酸甘油酯的检测。
【关键词】：共轭亚油酸甘油酯 检测方法 降脂 脂肪酸组成 抗氧化
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R155.5
【目录】：

• 摘要2-4
• Abstract4-8
• 引言8-10
• 第一章 共轭亚油酸甘油酯检测方法的建立10-17
• 1 材料与方法10-11
• 1.1 主要试剂10
• 1.2 仪器及参数10
• 1.3 流动相及梯度10-11
• 1.4 样品测定11
• 1.4.1 样品溶液制备11
• 1.4.2 标准溶液制备11
• 2 结果11-15
• 2.1 溶剂空白对照谱图11-12
• 2.2 标准对照品谱图12
• 2.3 样品测定结果12-13
• 2.4 样品谱图13
• 2.5 方法学验证13-15
• 2.5.1 标准曲线绘制13-14
• 2.5.2 精密度实验14
• 2.5.3 检出限和定量限14-15
• 3 讨论15-17
• 第二章 共轭亚油酸甘油酯对大鼠降脂功能的研究17-29
• 1 材料与方法17-19
• 1.1 实验动物17
• 1.2 主要试剂17
• 1.3 主要仪器17
• 1.4 动物分组17-18
• 1.5 样本采集18
• 1.5.1 体长测量18
• 1.5.2 血清采集18
• 1.5.3 肝组织采集18
• 1.5.4 脂肪采集18
• 1.6 指标测定18-19
• 1.6.1 大鼠肝脏病理检测18-19
• 1.6.2 血清生化指标测定19
• 1.6.3 血清脂肪酸组成检测19
• 1.6.4 抗氧化指标检测19
• 1.7 数据处理19
• 2 结果19-26
• 2.1 共轭亚油酸甘油酯对大鼠体重的影响19-21
• 2.2 大鼠肝组织光镜下病理形态学观察21-22
• 2.3 共轭亚油酸甘油酯对大鼠Lee’s指数和脂体比的影响22
• 2.4 共轭亚油酸甘油酯对大鼠血脂的影响22-23
• 2.5 共轭亚油酸甘油酯对大鼠血清总脂肪酸组成的影响23
• 2.6 共轭亚油酸甘油酯对单一脂肪酸组成的影响23-25
• 2.7 几种典型脂肪酸的变化趋势25
• 2.8 共轭亚油酸甘油酯对大鼠血糖的影响25-26
• 2.9 共轭亚油酸甘油酯对大鼠血清抗氧化水平的影响26
• 3 讨论26-29
• 结论29-30
• 参考文献30-34
• 综述34-45
• 综述参考文献41-45
• 攻读学位期间的研究成果45-46
• 致谢46-47

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本文编号：1033057