油菜蜂花粉抗前列腺炎及增生活性成分的研究

发布时间：2017-10-28 21:02

  本文关键词：油菜蜂花粉抗前列腺炎及增生活性成分的研究

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【摘要】：油菜蜂花粉(Rape bee pollen)是由蜜蜂采集油菜花的花粉过程中加入花蜜和自身分泌物加工而成的,带有蜜蜂后肢夹痕的不规范团状物,内含丰富的生物活性物质,有抗前列腺疾病、抗肿瘤、清除自由基等活性。但目前油菜蜂花粉为原料的药物制剂起效缓慢,药量大,机制及活性物质基础研究不完善,因此本文为探索油菜蜂花粉抗前列腺疾病活性成分的物质基础,做了以下研究:(1)油菜蜂花粉不同提取物抗慢性非细菌性前列腺炎(CNP)的活性研究。用高浓度乙醇提取粉粹后的油菜蜂花粉得到醇提物,滤渣用去离子水再次提取得水提物。再用石油醚、乙酸乙酯对醇提物进行萃取,共得到油菜蜂花粉水提物、醇提物、石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物四个部分。建立角叉菜胶致大鼠前列腺炎模型研究探讨油菜蜂花粉各提取物抗CNP活性。结果表明醇提物和乙酸乙酯提取物均能显著降低CNP大鼠前列腺湿重、前列腺指数及血清和匀浆中的IL-8(白介素8)含量,而水提物、石油醚萃取物的抗CNP活性均不显著。且前列腺大体形态及组织病理学变化与实验室检测结果相符。(2)油菜蜂花粉各粗分组分抗CNP活性研究。将有抗CNP活性的醇提物和乙酸乙酯提取物合并,利用MCI色谱柱对合并组分进行粗分离,得到粗分组分CI、CII、CIII、CIV。分别作用于CNP模型大鼠,结果显示粗分组分CII、CIII可显著降低CNP模型大鼠前列腺湿重、前列腺指数、血清和组织匀浆中的IL-8含量,粗分组分CIV的抗CNP活性不显著,但具有利尿作用。前列腺大体形态及组织病理学变化与实验室检测结果相符。(3)组分CII、CIII、CIV混合物作用于雄激素诱导的BPH模型大鼠,结果显示混合物制剂可减小前列腺湿重和前列腺指数,降低BPH大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)、睾酮(T)、雌二醇(E2)的浓度。有效抑制前列腺增生。另外,根据IL-8浓度变化推测炎症可能伴随良性前列腺增生发生发展。并且混合物制剂可降低BPH模型大鼠IL-8的浓度(P0.01)。(4)油菜蜂花粉活性组分的分离鉴定。利用MCI、ODS等色谱柱对组分组分CII、CIII、CIV进行分离,经纯化后得化合物1、2、3。利用核磁共振波谱技术鉴定化合物1、2、3的物质结构:化合物1为十八碳-9Z,12Z,15Z-三烯酰基-N-乙基甘油醚;化合物2为1'-十八碳-9Z,12Z,15Z-三烯基-2'-甲氧基-3'-十八碳-9Z,12Z,15Z-三烯酰基-N-乙基-甘油醚;化合物3为HO-C6H4-CH=CH-CO-NH-(CH2)5-NH2。
【关键词】：油菜蜂花粉 前列腺炎 前列腺增生 结构鉴定
【学位授予单位】：江南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R151
【目录】：

• 摘要3-4
• Abstract4-6
• 中英文缩略词表6-10
• 第一章 绪论10-19
• 1.1 前言10-11
• 1.2 蜂花粉的化学成分及药理活性11-14
• 1.2.1 蜂花粉的化学成分11-13
• 1.2.2 蜂花粉的药理活性13-14
• 1.3 前列腺炎概述14-16
• 1.3.1 前列腺炎的发病机制、治疗及诊断15
• 1.3.2 前列腺炎模型15-16
• 1.4 前列腺增生概述16-17
• 1.4.1 前列腺增生的发病机制、治疗及诊断16-17
• 1.4.2 前列腺增生的模型17
• 1.5 蜂花粉抗前列腺疾病国内外研究进展17-18
• 1.6 立题背景和意义18
• 1.7 研究内容18-19
• 第二章 油菜蜂花粉不同萃取物抗CNP活性研究19-25
• 2.1 引言19
• 2.2 实验材料与仪器19
• 2.2.1 实验材料19
• 2.2.2 实验仪器19
• 2.3 实验方法19-21
• 2.3.1 油菜蜂花粉的提取19-20
• 2.3.2 角叉菜胶致大鼠CNP模型的建立20
• 2.3.3 相关指标的测定20
• 2.3.4 统计学方法20-21
• 2.4 结果与讨论21-24
• 2.4.1 各组大鼠的一般情况21
• 2.4.2 前列腺大体形态观察21
• 2.4.3 前列腺病理组织变化21-22
• 2.4.4 各萃取物对CNP模型大鼠器脏指数的影响22-23
• 2.4.5 各萃取物对CNP模型大鼠血清中IL-8、TNF-a的影响23
• 2.4.6 各萃取物对CNP模型大鼠尿量及饮水量的影响23-24
• 2.5 本章小结24-25
• 第三章 油菜蜂花粉不同组分抗CNP活性研究25-31
• 3.1 引言25
• 3.2 实验材料与仪器25
• 3.2.1 实验材料25
• 3.2.2 实验仪器25
• 3.3 实验方法25-27
• 3.3.1 TLC法25-26
• 3.3.2 粗分组分样品制备26
• 3.3.3 相关指标的测定26-27
• 3.3.4 统计学方法27
• 3.4 结果与讨论27-30
• 3.4.1 各组大鼠的一般情况27
• 3.4.2 各组大鼠的前列腺大体形态肉眼观察27
• 3.4.3 各组大鼠前列腺病理组织变化27-28
• 3.4.4 不同组分对CNP模型大鼠脏器湿重和脏器指数的影响28-29
• 3.4.5 不同组分对CNP模型大鼠血清和匀浆中IL-8 的影响29
• 3.4.6 不同组分对CNP模型大鼠尿量和饮水量的影响29-30
• 3.5 本章小结30-31
• 第四章 油菜蜂花粉不用组分抗前列腺疾病活性研究31-37
• 4.1 引言31
• 4.2 实验器材与仪器31
• 4.2.1 实验材料31
• 4.2.2 实验仪器31
• 4.3 实验方法31-32
• 4.3.1 BPH模型大鼠的建立31
• 4.3.2 相关指标的测定31-32
• 4.3.3 统计与分析32
• 4.4 结果与讨论32-35
• 4.4.1 各组大鼠的一般情况32
• 4.4.2 各组大鼠的前列腺大体形态肉眼观察32-33
• 4.4.3 各组大鼠前列腺病理组织变化33
• 4.4.4 不同组分对BPH模型大鼠前列腺湿重、前列腺指数的影响33-34
• 4.4.5 不同组分对BPH大鼠PAP的影响34
• 4.4.6 不同组分对BPH大鼠T、E2的影响34-35
• 4.4.7 不同组分对BPH大鼠IL-8 及WBC的影响35
• 4.4.8 不同组分对BPH大鼠尿量和饮水量的影响35
• 4.5 本章小结35-37
• 第五章 油菜蜂花粉活性成分的分离鉴定37-47
• 5.1 引言37
• 5.2 实验材料与仪器37
• 5.2.1 实验材料37
• 5.2.2 实验仪器37
• 5.3 实验方法37-38
• 5.3.1 组分CII，CIII，，CIV的分离纯化37-38
• 5.3.2 化合物的纯度分析与结构鉴定38
• 5.4 实验结果38-45
• 5.4.1 组分CII，CIII，CIV经ODS柱层析粗分结果38-39
• 5.4.2 化合物的结构鉴定39-45
• 5.5 本章小结45-47
• 主要结论与展望47-48
• 主要结论47
• 展望47-48
• 致谢48-49
• 参考文献49-53
• 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文53

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