多重环介导等温扩增快速检测沙门菌、副溶血弧菌和单核细胞增生性李斯特菌方法的建立

发布时间：2017-11-06 07:48

  本文关键词：多重环介导等温扩增快速检测沙门菌、副溶血弧菌和单核细胞增生性李斯特菌方法的建立

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【摘要】：目的建立能够同时检测沙门菌、副溶血弧菌(VPH)和单核细胞增生性李斯特菌(LM)的多重环介导等温扩增(mL AMP)方法。方法分别针对沙门菌bcfD基因、VPH的tlh基因和LM的iap基因设计mL AMP引物,以LAMP进行单重LAMP检测。实时浊度监测扩增结果,优化引物浓度配比,进而建立此3种食源性致病菌的mL AMP检测体系,以PCR检测灵敏性作为比较,进行特异性和灵敏性分析。结果实时浊度监测表明,该mL AMP体系具有良好特异性,可在45 min内一次性检测以上3种致病菌,且无非特异扩增产生。这3种菌的检测最低限分别为300 fg/μl、4.2 pg/μl和4.5 pg/μl,与PCR检测灵敏度相当。结论该多重LAMP可同时检测食品中的沙门菌、VPH和LM,可作为大规模样品的初筛或传统方法的辅助方法,用于快速判定样品中是否含有这3种致病菌。
【作者单位】： 军事医学科学院疾病预防控制所;
【基金】：国家重大传染病专项资助项目(2013ZX10004-203) 国家自然科学基金资助项目(81501836)
【分类号】：R155.3
【正文快照】： 长期以来,食源性疾病是全球严重的公共卫生问题之一,且呈逐年上升态势。在我国,由生物性致病因子所致的感染性腹泻依然是发病最严重、流行 最广泛、影响最普遍的疾病[4]。在所有病因明确的食源性疾病中,细菌性病原占主要因素,其中副溶血弧菌已成为我国最主要的食源性致病菌,

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本文编号：1148001