双酚A对MCF-7细胞DNA甲基化的影响及其机制

发布时间：2017-11-17 14:25

  本文关键词：双酚A对MCF-7细胞DNA甲基化的影响及其机制

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【摘要】：目的 通过研究双酚A (Bisphenol A，BPA)对MCF-7细胞产生的DNA甲基化修饰作用及其机制探讨，进一步阐明双酚A促进乳腺癌的分子机制。 方法 选择浓度为10-7mol/L和10-6mol/L的BPA分别作用于MCF-7细胞24h、48h、72h，，0.1%DMSO为溶剂对照组。在染毒结束后，用免疫荧光法检测MCF-7细胞内5-mC的含量，用RT-PCR法检测DNMT1、DNMT3A、DNMT3B在mRNA水平的表达，用比色法检测甲基化转移酶活性的改变；用RT-PCR法检测MCF-7细胞内转录因子SP1和SP3在mRNA水平的表达，用免疫细胞化学法检测SP1和SP3在蛋白水平的表达。 结果 1.与溶剂对照组相比，在浓度为10-6mol/L BPA染毒后，各时间点的MCF-7细胞内5-mC的含量下降（P0.05）；10-7mol/L BPA染毒72h后，MCF-7细胞内5-mC的含量下降，与溶剂对照组相比，差异有统计学意义（P0.05）； 2.与溶剂对照组相比，10-6mol/L BPA染毒24h、48h、72h后，MCF-7细胞内DNMT1在mRNA水平表达下降（P0.05），而DNMT3A和DNMT3B表达上调（P0.05），10-7mol/L BPA在染毒72h后，引起DNMT3A和DNMT3B表达增加（P0.05）； 3.与溶剂对照组相比，在浓度为10-6mol/L BPA染毒24h、48h、72h后，MCF-7细胞DNMTS总活性升高（P0.05），10-7mol/L BPA染毒72h后，DNMTS的总活性升高（P0.05），差异有统计学意义。与整体DNA甲基化水平和DNMT3A、DNMT3B在mRNA表达水平的改变一致； 4.与溶剂对照组相比，浓度为10-6mol/L BPA在染毒后，各时间点的MCF-7细胞内SP1和SP3在mRNA水平和蛋白水平均表达增高，差异有统计学意义（P0.05）。10-7mol/L BPA在染毒48h后，引起MCF-7细胞内转录因子SP1在mRNA和蛋白水平的增加，与溶剂对照组性比，差异有统计学意义（P0.05）；在染毒72h后，引起MCF-7细胞内SP1和SP3在mRNA水平和蛋白水平均表达增高，与溶剂对照组性比，差异有统计学意义（P0.05）。 结论 1. BPA能够改变MCF-7细胞内DNA甲基化模式； 2. BPA作用后，使DNMT1表达下降，DNMT3A和DNMT3B表达上升，并增加DNMTS的总活性； 3. BPA染毒后，MCF-7细胞内转录因子SP1和SP3在mRNA水平和蛋白水平的表达均增加，是BPA调节DNMTS的可能机制。
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R114

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 王晓梅;洪燕;陈锋;;中低剂量双酚A对小鼠肝、肾氧化损伤作用的实验研究[J];实用预防医学;2013年03期

2 杨建平;袁建辉;胡恭华;纪卫东;张文娟;许玉玲;徐薇;杨淋清;张锦州;吴丽明;胡福勇;朱志良;吴礼康;庄志雄;;三氯乙酸染毒对肝L-02细胞的增殖作用及对DNA甲基化水平的影响[J];毒理学杂志;2008年05期

本文编号：1196356