香烟烟雾对小鼠卵母细胞染色质构型、DNA甲基化及相关基因表达的影响

发布时间：2018-01-22 11:16

  本文关键词： 香烟烟雾 染色质构型 DNA甲基化 小鼠卵母细胞　出处：《卫生研究》2017年02期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的探讨香烟烟雾暴露对小鼠卵母细胞染色质构型、全基因组DNA甲基化及相关基因表达的影响。方法将清洁级健康ICR雌鼠分成3组(对照组和香烟烟雾低剂量组、高剂量组),分别置于点燃0、1、2支香烟的染毒柜(容积18 L)中,每天2次,每次1 h,共4周。利用Hoechst 33342对细胞核染色,观察卵母细胞质量及染色质构型;间接免疫荧光法分析卵母细胞全基因组DNA甲基化模式,实时荧光定量PCR测定卵母细胞DNA甲基转移酶(DNA methyltransferases,DNMT)1、DNMT3a及DNMT3b基因的mRNA表达水平。结果随着烟雾浓度的升高,去透明带卵母细胞直径显著减小(P0.05),核仁未包围(non surrounded nucleolus,NSN)染色质构型比例明显升高(P0.05)。高剂量组卵母细胞DNA甲基化水平显著下降(P0.05)。随烟雾浓度升高DNMT1表达量降低,DNMT3b在高剂量组中表达水平显著降低(P0.05)。结论香烟烟雾暴露可能通过改变卵母细胞染色质构型,降低DNA甲基转移酶的表达,使DNA甲基化水平下降,从而降低卵母细胞质量。
[Abstract]:Objective to study the chromatin configuration of mouse oocytes after cigarette smoke exposure. Methods healthy female ICR mice were divided into three groups (control group, low dose cigarette smoke group and high dose group). Hoechst 33342 staining was used to observe the oocyte quality and chromatin configuration of the 2 cigarettes in the exposure cabinet (volume 18 L) twice a day for 1 hour for 4 weeks. The genomic DNA methylation pattern of oocytes was analyzed by indirect immunofluorescence assay. Real time fluorescence quantitative PCR was used to detect DNA methyltransferase (DNA) methyltransferasone (DNMT-1) in oocytes. Results with the increase of smoke concentration, the diameters of pellucida oocytes decreased significantly (P0.05). Nucleoli were not surrounded by surrounded nucleolus. The ratio of chromatin configuration of NSNs increased significantly (P 0.05). The DNA methylation level of oocytes in high dose group decreased significantly (P 0.05). The expression of DNMT1 decreased with the increase of smoke concentration. Conclusion cigarette smoke exposure may decrease the expression of DNA methyltransferase by changing the chromatin configuration of oocytes. Reduce the DNA methylation level, thereby reducing the quality of oocytes.
【作者单位】： 皖南医学院医学生物教研室皖南医学院遗传研究室活性生物大分子研究安徽省重点实验室;
【基金】：安徽省教育厅自然科学研究重点项目(No.KJ2016A735) 皖南医学院校中青年自然科学研究项目(No.WK201511)
【分类号】：R114
【正文快照】： 卵母细胞的发育过程对外部环境非常敏感,机体摄入环境毒物后,可在生殖系统中积累,损害生殖能力[1]。香烟烟雾包含尼古丁、焦油、烟碱等多种有害物质,是危害女性生殖健康的重要环境因素。在我国,高达64.3%非吸烟女性遭受被动吸烟的危害[2]。流行病学研究显示,主动或被动吸烟可

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本文编号：1454514